阿奇霉素单克隆抗体的制备及其免疫检测方法的建立

目的将阿奇霉素(AZM)通过衍生形成半抗原,制备小鼠抗阿奇霉素单克隆抗体(mAb),初步鉴定其特性。方法采用活性酯法使AZM与载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联,合成免疫抗原AZM-BSA和检测抗原AZM-OVA。用AZM-BSA免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得杂交瘤细胞株50D10。将该细胞株注射BALB/c小鼠制备AZM mAb,并以此mAb建立ELISA检测AZM的方法。结果 AZM mAb的效价为1∶4.0×10~5,属于IgG1型。建立的间接竞争ELISA(icELISA)灵敏度为0.287μg/L,半数抑制浓度(IC_(50))为1.33μg/L。AZM mAb与红霉素、罗红霉素、多拉菌素、克拉霉素、替米考星和泰乐菌素的交叉反应率均小于0.1%。牛奶中AZM的添加回收率在79.6%～104.1%之间,变异系数在16.4%～27.3%之间。结论制备出灵敏度高、特异性强的AZM mAb,为AZM的快速检测方法的建立奠定了基础。