AngⅡ通过AP-1调控内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达 |
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引用本文: | 冯治宽,单志新,林秋雄,朱杰宁,麦丽萍,谭虹虹,邓春玉,邝素娟,余细勇.AngⅡ通过AP-1调控内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的表达[J].热带医学杂志,2010,10(2). |
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作者姓名: | 冯治宽 单志新 林秋雄 朱杰宁 麦丽萍 谭虹虹 邓春玉 邝素娟 余细勇 |
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作者单位: | 广东省人民医院医学研究中心,广东省心血管病研究所,广州,510080 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,广东省自然科学基金 |
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摘 要: | 目的 明确介导AngⅡ调控人内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子(migration inhibitory factor,MIF)表达的转录因子.方法 构建长度依次递减的MIF基因5'调控区的荧光报告基因表达载体,并将其转化入人脐静脉内皮细胞EAhy926.利用双荧光基因报告系统检测AngⅡ诱导后MIF基因5'调控区不同区段的转录活性.通过突变转录活性高的MIF 5'调控区序列.初步确定可能的转录因子结合序列.设计针对可能的转录因子的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建其表达载体,分别检测候选转录因子沉默的HEAY926中MIF的转录活性和表达水平.结果 双荧光基因报告检测显示,Ang Ⅱ调控MIF表达的高转录活性区段位于-507至-188之间.序列突变和荧光素酶活性分析显示,MIF基因5'调控区-350至-339问的AP-1结合序列决定了MIF基因的转录活性.AP-1沉默后的HEAY926中AngⅡ调控的MIF转录活性显著降低(P<0.05),MIF mRNA和蛋白的表达水平也显著降低(P<0.05).结论 AngⅡ通过转录因子AP-1调控内皮细胞中MIF的表达.
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关 键 词: | 双萤光素酶报告基因系统 巨噬细胞移动抑制因子 AngⅡ 克隆 分子 |
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