| 基因的miRNA载体构建及其活性鉴定 |
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| 引用本文： | 唐焱,周宏,钟警,姜浩. 基因的miRNA载体构建及其活性鉴定[J]. 南华大学学报(医学版), 2012, 40(4): 360-363 |
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| 作者姓名： | 唐焱 周宏 钟警 姜浩 |
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| 作者单位： | 南华大学附属第一医院超声诊断科,湖南,衡阳,421001 |
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| 摘 要： | 目的 构建蛋白质精氨酸甲基转移酶2(PRMT2)基因的miRNA真核表达载体,鉴定其转染乳腺癌MCF7细胞株后的生物活性.方法 根据PRMT2基因序列设计合成4对pre-miRNA片段,定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,采用菌落的PCR和测序分析鉴定插入序列的完整性;并将重组载体转染至MCF7细胞株中,采用Western blot方法鉴定重组载体转染MCF7细胞后对PRMT2蛋白表达的干扰效果以确定其生物活性.结果 构建的重组体插入片段的碱基序列完全正确,并且重组体瞬时定转染MCF7细胞后成功干扰PRMT2的表达.结论 成功构建了靶向PRMT2基因的pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体,且在瞬时转染MCF7细胞后能下调PRMT2的表达.
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| 关 键 词： | miRNA 蛋白精氨酸N-甲基转移酶 雌激素受体α 转染 |
| 收稿时间： | 2012-05-09 |
Construction and Activity Identification of miRNA Expressing Eukaryotic Vector of PRMT2 |
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| TANG Yan,ZHOU Hong,ZHONG Jing,et al. Construction and Activity Identification of miRNA Expressing Eukaryotic Vector of PRMT2[J]. Journal of Nanhua University(Medical Edition), 2012, 40(4): 360-363 |
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| Authors: | TANG Yan ZHOU Hong ZHONG Jing et al |
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