雌激素受体α上调前列腺癌细胞株LNCaP中L-Plastin启动子转录活性研究

目的鉴定雌激素受体在L-Plastin启动子上的结合位点，进一步阐明雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中的作用机制。方法利用TFSEARCH软件分析L-Plastin启动子的序列，寻找可能调控L-Plastin表达的雌激素受体结合位点，利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子，检测切除该片段序列后荧光素酶活性，并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实雌激素受体是否结合于该位点，研究雌激素受体在激素依赖型前列腺癌中调控L-Plastin表达的作用。结果TF SEARCH软件分析表明，在L-Plastin启动子上距转录起始点-85～-70bp处，含有雌激素受体结合位点ATTTCACTGTGACCT，删除该结合位点后L-Plastin启动子荧光素酶活性明显下降。凝胶滞后实验和超滞后实验表明雌激素受体α是结合于该位点的转录因子。结论雌激素受体α具有促进L-plastin在激素依赖型前列腺癌中表达的作用。