| B组轮状病毒WH-2株vp7基因的原核表达与抗体的制备 |
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| 引用本文： | 胡英会,芦宝静,尹素改,陈强,王娜,杨继红. B组轮状病毒WH-2株vp7基因的原核表达与抗体的制备[J]. 中国卫生检验杂志, 2007, 17(5): 807-809 |
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| 作者姓名： | 胡英会 芦宝静 尹素改 陈强 王娜 杨继红 |
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| 作者单位： | 1. 华中师范大学生命科学院,武汉,430079
2. 中国科学院武汉病毒研究所,武汉,430071 |
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| 基金项目： | 武汉市科技引导计划;湖北省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的：在大肠杆菌中表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白并制备其兔抗血清。方法：根据B组轮状病毒（GBRV）WH-2株vp7基因的全序列设计引物,用PCR的方法扩增得到vp7基因的编码区。将其克隆到原核GST融合表达载体pGEX-KG内,转化大肠杆菌E.coliDH5α,IPTG诱导表达人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白,经SDS-PAGE分离纯化表达的蛋白免疫新西兰兔,制备人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白抗血清。结果：经鉴定确认,vp7基因以正确的方式插入到载体中,此重组表达载体经IPTG诱导后,可表达相对分子量为53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白。制备的抗血清经同样诱导表达的表达载体pGEX-KG表达产物吸收后1：500倍稀释后用Western Blot分析,与53.4 kDa的GST-VP7融合蛋白获得特异性显色信号。结论：人B组轮状病毒WH-2株VP7蛋白成功在大肠杆菌中GST融合表达,所表达的蛋白和制备的抗体不但为研究结构与功能提供了物质基础,也为GBRV所引起的疾病预防、诊断和治疗等流行病学研究和临床诊断奠定了基础,具有重要实际应用价值。
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| 关 键 词： | B组轮状病毒 vp7基因 克隆 GST融合蛋白表达 抗体制备 |
| 文章编号： | 1004-8685（2007）05-0807-03 |
| 收稿时间： | 2007-01-15 |
| 修稿时间： | 2007-01-15 |
Prokaryotic expression of vp7 gene from human group B rotavirus and generation of antibody |
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| Hu Ying-hui,Lu Bao-jing,Yin Su-gai,Chen Qiang,Wang Na,Yang Ji-hong. Prokaryotic expression of vp7 gene from human group B rotavirus and generation of antibody[J]. Chinses Journal of Health Laboratory Technology, 2007, 17(5): 807-809 |
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| Authors: | Hu Ying-hui Lu Bao-jing Yin Su-gai Chen Qiang Wang Na Yang Ji-hong |
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| Affiliation: | 1. Huazhong Normal University, Wuhan 430079, China; 2. Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Sciences, Wuhan 430071, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Group B rotavirus vp7 gene Clone Expression protein Preparation of antiserum |
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