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人脐带间充质干细胞在3种不同培养体系中的生长状况及腺病毒感染效率
引用本文:洪敬欣,张茜真,韩俊领,刘辉,刘剑,邱录贵.人脐带间充质干细胞在3种不同培养体系中的生长状况及腺病毒感染效率[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(1).
作者姓名:洪敬欣  张茜真  韩俊领  刘辉  刘剑  邱录贵
作者单位:1. 协和干细胞基因工程有限公司,天津市脐带血造血干细胞库,天津市,300384
2. 解放军第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海市,200438;浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所,浙江省杭州市,310018
3. 协和干细胞基因工程有限公司,天津市脐带血造血干细胞库,天津市,300384;中国医学科学院,北京协和医学院,血液学研究所,血液病医院,天津市,300020
4. 解放军第二军医大学东方肝胆外科医院病毒基因治疗实验室,上海市,200438
基金项目:天津市科技创新专项资金 
摘    要:背景:目前所报道的脐带间充质干细胞体外培养条件及培养效率不尽相同,尚缺乏统一标准.而且由于不同来源的间充质干细胞生物学特征尚有一定差异,因此建立脐带间充质干细胞简便、高效的培养体系十分必要.目的:观察人脐带来源的间充质干细胞在体外不同培养体系中的生长状态,以及不同腺病毒感染的效率.方法:采用胶原酶消化法从正常足月新生儿脐带中分离出间充质干细胞,贴壁法纯化培养,细胞贴壁后利用低糖DMEM,MesenPRO RS~(TM) Medium和STEMPRO~(R) MSC SFM这3种培养体系进行体外扩增.取对数生长期的第3~5脐带间充质干细胞,应用腺病毒Ad5-EGFP,Ad5/11-EGFP,Ad5/35-EGFP分别以感染复数=1,10,100进行感染,分别于感染后24,56,72 h倒置荧光显微镜观察病毒感染及绿色荧光表达情况.结果与结论:使用低糖DMEM培养的细胞初期融合时间长,STEMPRO~(R) MSC SFM培养的细胞虽然连接紧密,但消化传代后不易贴壁,而MesenPRO RS~(TM) Medium培养的细胞在相同时间内能达到较高的细胞密度,更适于脐带间充质干细胞的体外扩增.Ad5/35-EGFP感染脐带间充质干细胞的效率明显高于其他两种腺病毒,但可导致细胞凋亡;腺病毒Ad5/11-EGFP对脐带间充质干细胞的感染效率较佳,随着感染复数的升高,所表达的荧光强度也逐渐增大.

关 键 词:培养体系  腺病毒  感染效率  脐带间充质干细胞  干细胞

Growth state and adenovirus infection efficiency of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in 3 different culture systems
Hong Jing-xin,Zhang Qian-zhen,Han Jun-ling,Liu Hui,Liu Jian,Qiu Lu-gui.Growth state and adenovirus infection efficiency of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in 3 different culture systems[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2010,14(1).
Authors:Hong Jing-xin  Zhang Qian-zhen  Han Jun-ling  Liu Hui  Liu Jian  Qiu Lu-gui
Institution:Hong Jing-xin1,Zhang Qian-zhen2,3,Han Jun-ling1,4,Liu Hui2,Liu Jian1,Qiu Lu-gui1,41Union Stem Cell & Gene Engineering Co.,Ltd.,Tianjin Cord Blood Bank,Tianjin 300384,China,2Laboratory of Viral , Gene Therapy,Eastern Hepatobiliary Surgery Hospital,Second Military Medical University of Chinese PLA,Shanghai 200438,3Xinyuan Institute of Medicine , Biotechnology,College of Life Science,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,Zhejiang Province,4Institute of Hematology,Blo...
Abstract:BACKGROUND: In vitro culture condition and culture efficiency are different in reported umbilical cord-derived mesenchymal stem cells, and lacked of unified standards. Different derived mesenchymal stem cells have different biological properties. Therefore, it is very necessary to establish a simple and high-performance culture system for umbilical cord-derived mesenchymal stem cells. OBJECTIVE: To observe the growth state of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in different culture systems i...
Keywords:
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