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聚合酶链反应检测杜克雷嗜血杆菌实验研究
引用本文:张锡宝,费实,邓文国,曹文苓,朱慧兰,孟锦秀,颜景兰. 聚合酶链反应检测杜克雷嗜血杆菌实验研究[J]. 中国麻风皮肤病杂志, 2000, 16(4): 229-231
作者姓名:张锡宝  费实  邓文国  曹文苓  朱慧兰  孟锦秀  颜景兰
作者单位:1. 广州市皮肤病防治所,510095
2. 中山医科大学达安基因诊断中心,510095
摘    要:目的近年来,国内不断有软下疳病例报告,但无1例有可靠的实验室依据.因此,探讨聚合酶链反应(PCR)检测杜克雷嗜血杆菌(H.ducreyi)的方法将其应用于临床实践,是目前我国性病防治工作的迫切要求.方法根据杜克雷嗜血杆菌的特异性16srRNA基因序列设计上下游引物对两株参考菌株进行PCR扩增,其扩增产物以1.5%琼脂糖凝胶电泳进行检测,并测序证实.并用其它的同源或相关病原微生物进行PCR扩增,证实其特异性.再以不同浓度菌悬液扩增检测其敏感性.结果所试两株不同来源的杜克雷嗜血杆菌的扩增呈现单一扩增区带,电泳片段位置与预期结果438bp相符,测序结果与基因库序列一致,并用具有同源及相关的微生物共19种在相同条件下同时扩增,除杜克雷嗜血杆菌外,均未扩增出预期片断,测试的最高敏感度可达10-6 ng/μl.结论应用PCR技术检测杜克雷嗜血杆菌具有迅速、特异、敏感、简便的特点,在严格控制实验条件的情况下,PCR具有很大的实用价值,是诊断杜克雷嗜血杆菌感染的实验诊断方法.

关 键 词:杜克雷嗜血杆菌  聚合酶链反应  实验诊断
修稿时间:2000-04-17

Investigation on detection of Haemophilus ducreyi by polymerase chain reaction
Abstract:
Keywords:
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