以逆转录病毒为载体的IL—2基因转染K562细胞的研究

目的：研究以逆转录病毒为载体将IL-2基因转入K562细胞及表达情况。方法：应用脂质体介导的基因转移法，将质粒PGEN/IL-2导入包装细胞PA317，将K562细胞与PA317/IL-2细胞共培养，检测IL-2cDNA整合，mRNA转录情况，以IL-2依赖性CTLL-2细胞测定培养细胞上清中IL——2产量，比较转染前后细胞的体外生长情况和致瘤性。结果；IL-2cDNA成功整合入K562细胞基因组中并稳定表达，K562/IL-2细胞培养24h上清中IL——2活性为100U/ml，体内外观察均见细胞生长减慢。结论：以脂质体介导的以双顺反子逆转录病毒为载体的基因转移方法。可成功地将人IL-2基因转入人白血病细胞株K562，并持续分泌高活性的IL-2，为下一步将IL-2基因转入CML造血细胞的研究打下基础。