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结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究
引用本文:车南颖,丁志鑫,王伟,张旭霞,李传友. 结核分枝杆菌特异基因MPT64-Rv1985c融合蛋白的免疫诊断价值研究[J]. 北京医学, 2012, 34(9): 796-800
作者姓名:车南颖  丁志鑫  王伟  张旭霞  李传友
作者单位:首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室北京市结核病胸部肿瘤研究所,101149;首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室北京市结核病胸部肿瘤研究所,101149;首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室北京市结核病胸部肿瘤研究所,101149;首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室北京市结核病胸部肿瘤研究所,101149;首都医科大学附属北京胸科医院细菌免疫室北京市结核病胸部肿瘤研究所,101149
基金项目:国家自然科学基金,北京市优秀人才培养计划
摘    要:目的表达和纯化结核分枝杆菌特异蛋白MPT64、Rv1985c及其融合蛋白MPT64-Rv1985c,探讨3种抗原在结核病免疫诊断中的价值。方法通过PCR获得基因MPT64、Rv1985c及其融合基因,并克隆到pET32a(+)表达载体,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后用镍柱进行纯化,再用SDS-PAGE及Western blot方法检测并鉴定目的产物。采用ELISA方法检测3种抗原在血清及胸腔积液样本中的结核病诊断效率。结果 3种目的蛋白均以包涵体形式表达。经过纯化及复性获得纯度较高的可溶性蛋白。血清及胸腔积液样本中特异性IgG抗体检测结果显示,融合蛋白MPT64-Rv1985c在诊断肺结核、肺外结核的敏感性为87.1%和88.9%,特异性为75.6%;诊断结核性胸膜炎的敏感性为91.2%,特异性为84.6%,敏感性较单一抗原MPT64及Rv1985c有显著提高(P﹤0.05)。结论融合蛋白MPT64-Rv1985c诊断效果显著高于单一抗原,在结核病诊断中具有重要的研究价值。

关 键 词:结核分枝杆菌  融合蛋白  特异抗原  诊断

Research on immunodiagnostic value of specific genes of fusion protein MPT64-Rv1985c in Mycobacterium tuberculosis
Affiliation:CHE Nan-ying, DING Zhi-xin, WANG Wei, et al (Department of Bacteriology and Immunology, Beijing Chest Hospital, Capital Medical University ,Beijing Tuberculosis and Thoracic Tumors Research Institute, Beijing 101149)
Abstract:
Keywords:
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