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小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达
引用本文:张小勤,李峰,赵艳,彭映基,潘玉春,崔芳岩,孟和. 小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2007, 11(19): 3771-3774
作者姓名:张小勤  李峰  赵艳  彭映基  潘玉春  崔芳岩  孟和
作者单位:1. 中山大学中山医学院解剖学教研室,广东省广州市,510080
2. 上海交通大学农业与生物学院,上海市,200240
摘    要:目的:分析小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因(Beta-site APP cleaving enzyme protein,BACE1)的表达情况。方法:实验于2004-12/2006-06在中山大学中山医学院和上海交通大学农业与生物学院完成。①用脂质体将EGFP基因表达载体pEGFP-C1 Vector和体外转录合成的针对EGFP基因的小干扰RNA(siEGFP)分别或同时转染neuro-2a细胞,在倒置荧光显微镜下计算EGFP在neuro-2a细胞中的表达率。②将体外转录合成的siBACE1-1,siBACE1-2,siBACE1-3转染neuro-2a细胞,干扰24,48,72h后分别用Real time RT-PCR定量分析siBACE1对内源BACE1基因表达的抑制率和干扰的时效性。结果:①外源EGFP基因转染neuro-2a细胞后,43%neuro-2a细胞高表达EGFP蛋白。通过转染siEGFP则可有效抑制EGFP基因表达。②3个干扰位点的siBACE1对BACE1基因表达有不同的抑制效率,siBACE1-3使BACE1m RNA表达水平下降60%,siBACE1-1为13%,siBACE1-2对BACE1 mRNA无明显的抑制作用。③siBACE1抑制内源BACE1基因的表达与干扰时间相关,siBACE1干扰24h、48h后BACE1 mRNA的表达与正常组无明显差异(P>0.05),但干扰72h后,siBACE1-3和siBACE1-1均使BACE1 mRNA表达量下降。结论:体外转录合成的siBACE1能有效抑制neuro-2a细胞内源BACE1基因表达,其抑制率与BACE1基因的干扰位点和干扰时间相关。

关 键 词:RNA干扰  基因  神经元
文章编号:1673-8225(2007)19-03771-04
修稿时间:2006-04-272007-01-18

Small interference RNA inhibits the endogenous expression of beta-site APP cleaving enzyme-1 protein in neuro-2a cells
Zhang XQ,Li F,Zhao Y,Peng YJ,Pan YC,Cui FY,Meng H. Small interference RNA inhibits the endogenous expression of beta-site APP cleaving enzyme-1 protein in neuro-2a cells[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2007, 11(19): 3771-3774
Authors:Zhang XQ  Li F  Zhao Y  Peng YJ  Pan YC  Cui FY  Meng H
Affiliation:1Department of Anatomy, Zhongshan School of Medicine, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510080, Guangdong Province, China; zCollege of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China
Abstract:
Keywords:BACE1
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