siRNA抑制人黑色素瘤A375细胞株VEGF的表达及细胞增殖

目的 研究小干扰RNA( siRNA)对人黑色素瘤A375细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的抑制作用及对癌细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡的作用.方法 设计并合成特异性靶向人VEGF基因的siRNA,通过脂质体转染到A375细胞中.RT-PCR检测siVEGF对VEGF基因表达的抑制作用；MTT法检测siVEGF对癌细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测siVEGF诱导细胞凋亡的作用.稳定转染的肿瘤细胞株接种于裸鼠皮下,观察肿瘤细胞成瘤情况.结果 转染siVEGF1和siVEGF2组VEGFmRNA表达水平与空白对照组比较分别下调了59.92％和69.63％,转染阴性对照质粒组VEGF基因表达水平都无明显改变.转染siVEGF1和siVEGF2的细胞增殖受到抑制,增殖抑制率具有时间依赖性,细胞的凋亡率分别为33.8％和41.1％.转染SiVEGF2的A375细胞成瘤率平均为66.7％和50％,而对照组成瘤率均为100％.结论 构建的siRNAVEGF能有效抑制人黑色素瘤A375细胞增殖及成瘤率,诱导其凋亡,其机制可能与其特异性有效下调VEGF基因的表达有关.