摘 要: | 目的:构建包含丙型肝炎病毒(HCV)C区、E2区及NS3区的嵌合重组载体。方法:设计合成3对寡核苷酸引物,用PCR法从HCV重组质粒pHCVc、pBE2和pGMXNS3-5中特异扩增出编码HCV C区、E2和NS3区抗原的部分基因片段(501、603和900bp),分别用HindⅢ、BamHⅠ、EcoRⅠ和XhoⅠ酶切后,逐个定向连接到质粒pcDNA3中,转化宿主菌XL1-Blue,分别用上述内切酶酶切及DNA测序鉴定重组质粒。结果:酶切鉴定示所切下的片段大小与预计相符,测序结果与文献报道序列及预计结果一致,证实符合表达框架。结论成功构建了HCV嵌合重组质粒pcDNA3-C-E2-NS3.
|