| 广佛手UDP-鼠李糖合成酶基因的克隆及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 周良云,蔡启忠,刘长征,刘露,张春荣,杨全.广佛手UDP-鼠李糖合成酶基因的克隆及功能鉴定[J].中草药,2021,52(16):5005-5011. |
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| 作者姓名： | 周良云 蔡启忠 刘长征 刘露 张春荣 杨全 |
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| 作者单位： | 广东药科大学中药学院 国家中医药管理局岭南药材生产与开发重点研究室 国家中药材产业技术体系 广州综合试验站, 广东 广州 510006 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2017YFC1700704）；2017年广东省岭南中药材保护资金专项（粤财社[2017]60号）；广东省普通高校青年创新人才类项目（2018KQNCX133） |
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| 摘 要： | 目的对广佛手Citrus medica var.sarcodactylis中参与合成UDP-鼠李糖的UDP-鼠李糖合成酶(UDP-rhamnose synthase,RHM)基因进行全长cDNA克隆、功能鉴定及差异表达分析。方法基于广佛手转录组数据,筛选和克隆广佛手鼠李糖合成酶基因(CmRHM1)的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析;构建原核表达载体,通过体外酶促反应鉴定CmRHMl的功能;利用实时荧光定量PCR分析广佛手不同器官中CmRHM1基因的表达特性。结果CmRHM1基因的开放阅读框(ORF)长度为2007 bp,编码668个氨基酸。该基因编码蛋白的相对分子质量为75 330、理论等电点是6.97,为亲水蛋白,无信号肽。多重序列比对显示CmRHMl在序列的N-端和C-端均含有高度保守的2个结构域(GxxGxxG/A和YxxxK)。体外酶促反应结果表明CmRHMl蛋白具有催化UDP-Glc合成UDP-Rha的功能。实时荧光定量结果显示该基因在广佛手的茎、叶和果实中的表达水平依次为叶果实茎。结论CmRHM1基因的功能鉴定为UDP-鼠李糖及鼠李糖糖苷的生物合成奠定了物质基础。
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| 关 键 词： | 佛手 UDP-鼠李糖合成酶 UDP-鼠李糖 基因克隆 功能鉴定 |
| 收稿时间： | 2021/2/13 0:00:00 |
Cloning and characterization of a UDP-rhamnose synthase gene from Citrus medica |
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| ZHOU Liang-yun,CAI Qi-zhong,LIU Chang-zheng,LIU Lu,ZHANG Chun-rong,YANG Quan.Cloning and characterization of a UDP-rhamnose synthase gene from Citrus medica[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2021,52(16):5005-5011. |
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| Authors: | ZHOU Liang-yun CAI Qi-zhong LIU Chang-zheng LIU Lu ZHANG Chun-rong YANG Quan |
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| Institution: | School of Traditional Chinese Medicine, Guangdong Pharmaceutical University/Key Laboratory of State Administration of Traditional Chinese Medicine for Production & Development of Cantonese Medicinal Materials/Comprehensive Experimental Station of Guang zhou, Chinese Materia Medica, China Agriculture Research System, Guangzhou 510006, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Citrus medica L var sarcodactylis Swingle UDP rhamnose synthase UDP-rhamnose cloning characterization |
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