p16基因对舌鳞癌细胞生物学特性影响的研究 |
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作者姓名: | 刘刚 林世珍 蔡崇弘 周明勇 |
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作者单位: | 1. 武汉大学口腔医学院口腔颌面外科, 2. 台湾中山医学院 |
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摘 要: | p16基因是一个多种肿瘤抑制基因 ,其编码蛋白为周期依赖性激酶 4(CDK4)的抑制因子 ,能阻止CDK4与细胞周期素D结合 ,从而使细胞周期阻滞在G1期[1] 。我们为了探讨引入野生型p16基因后口腔鳞癌细胞生物学的变化 ,构建了p16基因真核表达质粒 ,并于体外转染p16基因产物缺乏的舌鳞癌细胞TSCCa中 ,探索p16基因治疗口腔鳞癌的可行性。1 材料 :pcDNA3真核表达质粒 ;人舌鳞癌细胞系TSCCa ;p16的RT PCR引物顺序 :正义链 :5′ GCGCGGATCCATGGAGCCTTCGGCTGACTGG 3′ ;反义链 :5′ GCGCGAATTCTCAATCGGGGATGTCTGAGGG 3′。2 .方法 :(1)pcDNA p16真核表达质粒的构建 :常规提取pcDNA3质粒DNA ,BamH1和EcoR1酶切 ;提取人正常口腔粘膜总RNA ;RT PCR扩增p16全长cDNA ;BamH1和EcoR1酶切 ,纯化后和线性pcDNA3进行连接反应 ,筛选阳性克隆 ,BamH1和EcoR1酶切鉴定定向克隆的重组质粒pcDNA3 p16。(2 )pcDNA3和pcDNA3 p16转染TS...
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修稿时间: | 2000-01-01 |
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