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人穿孔素在杆状病毒中的克隆和表达
引用本文:朱曦,王旻,秦浚川,唐晶. 人穿孔素在杆状病毒中的克隆和表达[J]. 药物生物技术, 2001, 8(2): 75-77
作者姓名:朱曦  王旻  秦浚川  唐晶
作者单位:1. 中国药科大学生物制药学院,南京 210009
2. 南京大学医药生物技术国家重点实验室,南京 210093
基金项目:本课题由南京大学医药生物技术国家重点实验室开放基金部分资助
摘    要:穿孔素是机体免疫系统中具有免疫杀伤作用的一种重要效应物质,由于昆虫杆状病毒表达系统和原核表达系统相比能对表达产物进行翻译后加工,所以选择昆虫细胞真核表达人穿孔素,交人穿孔素基因插入杆状病毒转移载体pAcSecG2T中和野生昆虫杆状病毒共转染 sf9细胞,筛选得重组病毒,在sf9细胞中分泌表达含凝血酶位点的GST-hp融合蛋白,产物呈现钙依赖的溶红细胞活性,并且经Dot-Blot检测表明具有免疫活性。

关 键 词:穿孔素 杆状病毒 表达系统 融合蛋白 克隆 基因表达
文章编号:1005-8915(2001)02-075-03

Clone and Expression of Human Perforin in Baculovirus System
Zhu Xi,Wang Min,QIN Junchuan,Tang Jing. Clone and Expression of Human Perforin in Baculovirus System[J]. Pharmaceutical Biotechnology, 2001, 8(2): 75-77
Authors:Zhu Xi  Wang Min  QIN Junchuan  Tang Jing
Abstract:Human perforin gene was transferred into the genome of Autographa californica nuclear polyhedrosis virus(AcNPV) by transfer vect or pAcSecG2T which contain gp6 7 leader sequence and glutathione S-transferase gene. The recombinant Baculovir u s expressed fusion protein GST-hp in sf9 cell. There is a thrombin cleavage sit e in this fusion protein. The activity of GST-hp was measured by hemolysis and immunological assay.
Keywords:Perforin  Baculovirus expression vector  Fusion prote in
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