Med19基因沉默对p53野生型和突变型乳腺癌细胞紫杉醇化疗疗效的影响

目的：探讨下调中介体（mediator，Med）19表达是否增加紫杉醇(pacliatxel, PTX)对p53野生型和突变型乳腺癌细胞化疗的疗效。方法：构建Med19RNA干扰（RNAi）慢病毒，分别感染p53野生型的乳腺癌细胞MCF-7和p53突变型的乳腺癌细胞MDA-MB-231，两种细胞均分为Med19基因敲减组（KD组：细胞感染pGcscil-Med19-siRNA-GFP ）、空载体感染组（NC 组：细胞感染pGcscil-Med19-NC-GFP）、对照组（CON组：未感染慢病毒的乳腺癌细胞），荧光显微镜观察慢病毒感染效率。Western blotting检测Med19基因沉默后各组细胞内P53、磷酸化P53（pP53）、P21蛋白表达水平的变化。紫杉醇分别作用于Med19基因沉默前后的MCF-7和MDA-MB-231细胞，MTT法检测细胞增殖抑制率的变化，流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化。结果：KD组和NC组细胞的荧光感染效率均大于90%，表明获得了满意的感染效率。与CON组和NC组相比，两种细胞KD组的Med19蛋白表达水平均下降，差异有统计学意义（均P<0.05）。MCF-7细胞KD组P53、pP53、P21蛋白表达上调，差异有统计意义（均P<0.05）。在0.01～50 μg/ml 范围内，紫杉醇抑制两种乳腺癌细胞的生长增殖并呈浓度依赖性（P<0.05），对KD组的抑制率和细胞凋亡率均高于NC组及CON组，差异有统计学意义（均P<0.05）；但MDA-MB-231细胞各组间抑制率差异无统计学意义（均P>0.05）。10 μg/ml紫杉醇导致两种细胞的KD组和NC组均出现G2/M期阻滞，并且MCF-7细胞KD组G0/G1期细胞较NC组显著增加（P<0.05）。结论：Med19基因沉默增强紫杉醇对p53野生型乳腺癌MCF-7细胞化疗的疗效，其机制可能为增强了p53基因的表达活化，通过其下游基因p21 调节细胞周期、促进细胞凋亡。