| 永生化人肝细胞系的建立及其生物学特性 |
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| 引用本文： | 杭化莲,张磊,施晓雷,卞建民,丁义涛.永生化人肝细胞系的建立及其生物学特性[J].江苏医药,2011,37(22). |
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| 作者姓名： | 杭化莲 张磊 施晓雷 卞建民 丁义涛 |
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| 作者单位： | 1. 210006,南京医科大学附属南京第一医院普通外科
2. 南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科 |
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| 摘 要： | 目的 建立一种由慢病毒载体表达人端粒酶反转录酶亚单位,具有原代肝细胞的特性的永生化肝细胞系.方法 采用离体两步胶原酶灌注法无菌条件下分离肝细胞,构建慢病毒载体并包装高滴度慢病毒,肝细胞被采用表达永生化基因的慢病毒转染.通过筛选功能基因阳性表达克隆建立永生化肝细胞系,倒置相差显微镜观察形态学变化,免疫组化检测细胞角蛋白18(CK18)表达,RT-PCR及Westernblot检测功能基因及蛋白表达.结果 采用功能基因阳性表达筛选建立了永生化肝细胞系,其可连续扩增传代,具有原代肝细胞的特性并未呈现致瘤性,揭示出肝脏实质细胞的形态学特征并且表达肝细胞主要的功能基因标志.结论 通过功能基因阳性表达筛选成功建立具有原代肝细胞特性的永生化肝细胞系.
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| 关 键 词： | 人原代肝细胞 永生化 |
Establishment and biological study of immortalized human hepatocyte cell line |
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