| 大鼠白细胞介素—10cDNA的克隆 |
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| 引用本文： | 陈家存,畅继武,马腾骧.大鼠白细胞介素—10cDNA的克隆[J].徐州医学院学报,2001,21(2):91-94. |
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| 作者姓名： | 陈家存 畅继武 马腾骧 |
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| 作者单位： | 天津泌尿外科研究所, |
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| 摘 要： | 目的：克隆大鼠白细胞介素－10（IL－10)cDNA的全长序列，为其分子生物学利用奠定基础，方法：无菌条件下切取大鼠的脾脏，收集脾细胞，用脂多糖（LPS）刺激培养4h离心得到一定量细胞，加入变性液，一步法提取细胞总RNA；逆转录合成IL－10的第1条链，用自己设计的特异性上下游引物进行PCR扩增，得到期望相对分子质量的PCR产物；酶切后插入pcDNA3载体，转染感受态细胞进行筛选制备，并行PCR、酶切鉴定和测序。结果：脾细胞经LPS刺激后IL－10转录水平增加，从提取的RNA转录产物中容易扩增出期望相对分子质量的PCR产物，酶切和PCR鉴定证明所得IL－10cDNA相对分子质量与其因库报告的相近，测序表明得到的IL－10cDNA充阢与基因库报告的序列完全一致，结论，大鼠的IL－10cDNA全长序被成功克隆。
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| 关 键 词： | 大鼠 白细胞介素－10 克隆 cDNA |
| 文章编号： | 1000-2065(2001)02-0091-04 |
Molecular cloning of rat interleukin- 10 cDNA |
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| CHEN Jia-cun,CHANG Ji-wu,MA Teng-xiang.Molecular cloning of rat interleukin- 10 cDNA[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2001,21(2):91-94. |
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| Authors: | CHEN Jia-cun CHANG Ji-wu MA Teng-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | rat interleukin-10 cloning |
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