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Smac基因的克隆及其对Burkitt''''s淋巴瘤细胞的促凋亡作用
引用本文:陆超,吴升华,陈吉庆,赵非,池霞,潘晓勤,费莉,郭梅,黄松明,郭锡熔,陈荣华. Smac基因的克隆及其对Burkitt''''s淋巴瘤细胞的促凋亡作用[J]. 中华儿科杂志, 2005, 43(7): 503-506
作者姓名:陆超  吴升华  陈吉庆  赵非  池霞  潘晓勤  费莉  郭梅  黄松明  郭锡熔  陈荣华
作者单位:1. 210029,南京医科大学第一附属医院儿科
2. 南京市儿童医院肾科
3. 南京医科大学儿科研究所
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371502);江苏省卫生厅135工程项目(2002-45)
摘    要:目的克隆人促凋亡基因(second mitochondria-derived activator of caspases,Smac),研究Smac基因转染对Burkitt's淋巴瘤Raji细胞的促凋亡作用.方法从人胚肾293细胞中扩增人Smac基因全长的cDNA;构建含Smac基因全长cDNA的真核表达载体pcDNA3.1/Smac,并转染人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞;用Western blot测定外源基因的表达;Hoechest 33 258和碘化丙锭双荧光染色,结合激光共聚焦显微镜观察细胞凋亡形态;流式细胞仪分析细胞凋亡百分率;比色法测定caspase-3酶活性.结果成功克隆人Smac基因全长cDNA,并构建真核表达载体pcDNA3.1/Smac;转染人Smac基因全长cDNA的真核表达载体24 h,可显著诱导Burkitt's淋巴瘤Raji细胞的凋亡,凋亡百分率达(43.7±2.5)%;转染人Smac基因全长cDNA的真核表达载体24 h,可显著诱导Raji细胞中caspase-3酶活性上调,吸光度为0.936±0.041,与正常对照组(0.138±0.026)及空载体转染对照组(0.136±0.036)相比,P <0.05.结论转染并表达外源性Smac基因,可显著诱导人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞凋亡.其机制可能与caspase-3酶活性上调有关.

关 键 词:载体蛋白质类   线粒体蛋白质类   伯基特淋巴瘤   细胞凋亡
修稿时间:2004-08-04

The cloning of human Smac gene and its pro-apoptotic effect on Burkitt''''s lymphoma cells
LU Chao,WU Sheng-hua,CHEN Ji-qing,ZHAO Fei,CHI Xia,PAN Xiao-qin,FEI Li,GUO Mei,HUANG Song-ming,GUO Xi-rong,CHEN Rong-hua. The cloning of human Smac gene and its pro-apoptotic effect on Burkitt''''s lymphoma cells[J]. Chinese journal of pediatrics, 2005, 43(7): 503-506
Authors:LU Chao  WU Sheng-hua  CHEN Ji-qing  ZHAO Fei  CHI Xia  PAN Xiao-qin  FEI Li  GUO Mei  HUANG Song-ming  GUO Xi-rong  CHEN Rong-hua
Abstract:
Keywords:
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