痴呆康复冲剂对血管性痴呆大鼠脑细胞损伤的保护机制

目的:观察痴呆康复冲剂对血管性痴呆大鼠脑细胞损伤后的学习记忆能力、大鼠海马锥体细胞形态改变及对海马CA1区细胞数和生长抑素阳性神经元数的影响。方法:实验于2005-06/10在华中科技大学同济医学院生理教研室完成。①选用Wistar大鼠108只,雄性。按随机数字表法分为3组:假手术组、模型组和痴呆康复冲剂组,每组36只。②采用4血管阻断法制作痴呆大鼠动物模型。假手术组:开颅但不阻断颈总动脉,正常饲养。痴呆康复冲剂组:按1.08g/(kg·d)的剂量连续灌胃痴呆康复冲剂(由黄芪、丹参、制首乌、枸杞子、熟地黄、赤芍药、郁金、远志和紫车河等组成,按药典标准配制成煎膏剂,使用时配成混悬液,由本院自制),共14d,然后造模,术后5d,连续灌服痴呆康复冲剂。模型组:造模后每天灌胃等量生理盐水。各组均于造模后干预120d。③采用水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力:用一约1m3有机玻璃槽,槽内为迷宫状,有多处盲端。实验时,槽内充水,水深20cm,水温(25±2)℃。造模后第7天,训练4次,第5次记录其游完全程的时间和5min内进入盲端的次数作为学习成绩。24h后再测一次上述指标作为记忆成绩。上述实验于造模后30,60,120d进行。④造模后120d,取脑,制成切片,内氏体染色,光镜(×50,×400)观察海马细胞形态变化。计数1mm2海马CA1区中段正常细胞数,取双侧海马细胞数的均值为CA1区细胞计数。免疫组化反应法检测海马生长抑素阳性神经元数目。⑤组间计量资料差异比较采用t检验。结果:大鼠108只均进入结果分析。①造模后30d,模型组大鼠水迷宫实验游完全程时间明显长于假手术组(P<0.05),与痴呆康复冲剂组相近(P>0.05)。造模后60,120d,模型组大鼠水迷宫实验游完全程时间明显长于其他2组(P<0.05)。②造模后30,120d,模型组大鼠水迷宫实验5min内进入盲端次数明显多于假手术组(P<0.05),与痴呆康复冲剂组相近(P>0.05)。造模后60d,模型组大鼠水迷宫实验5min内进入盲端次数明显多于其他2组(P<0.01,0.05)。③痴呆康复冲剂组大鼠CA1区细胞线清晰,锥体细胞形态大多数正常,无明显细胞变性、坏死,明显优于模型组,CA1区细胞计数接近正常,细胞排列紧密,数量明显增多,尼氏体丰富,见仅见少数细胞变性、坏死。④造模后120d,模型组大鼠海马CA1区单位面积细胞计数和海马生长抑素阳性神经元数目明显少于其他2组(P<0.01)。结论:痴呆康复冲剂能改善血管性痴呆大鼠海马CA1区的细胞形态,增加海马生长抑素阳性神经元数目,增强学习记忆功能,有明显神经保护作用。

Mechanism of dementia recovery preparation against brain cellular damage in rats with vascular dementia