| RKIP的克隆、表达及其影响肿瘤细胞迁移性质的初步研究 |
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| 引用本文： | 皮亚洲,华子春. RKIP的克隆、表达及其影响肿瘤细胞迁移性质的初步研究[J]. 东南大学学报(医学版), 2014, 33(6) |
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| 作者姓名： | 皮亚洲 华子春 |
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| 作者单位： | 南京大学医药生物技术国家重点实验室,江苏南京,210093 |
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| 摘 要： | 目的:研究Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在细胞外对肿瘤细胞迁移的影响.方法:通过PCR扩增得到RKIP基因片段,使用BamH I和HindⅢ双酶切并回收,然后插入双酶切过的原核表达载体pET28a(+),得到pET28a-RKIP重组质粒.将重组质粒转化表达菌株BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经Ni+金属螯合层析纯化得到His-RKIP重组蛋白.通过伤口愈合实验,观察不同浓度的重组RKIP在细胞外对肿瘤细胞迁移的影响.结果:重组RKIP获得了高效表达和分离纯化,伤口愈合实验表明,在低浓度重组RKIP作用下A549肿瘤细胞迁移速度增加,在高浓度下肿瘤细胞迁移速度降低.结论:重组RKIP在细胞外具有促进和抑制A549肿瘤细胞迁移的双重作用,具体表现为低浓度时促进A549肿瘤细胞迁移,高浓度时抑制A549肿瘤细胞迁移.
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| 关 键 词： | Raf激酶抑制蛋白 表达 纯化 细胞迁移 |
Cloning,expression and purification of RKIP and preliminary study on its biological properties in tumor metastasis |
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| PI Ya-zhou,HUA Zi-chun. Cloning,expression and purification of RKIP and preliminary study on its biological properties in tumor metastasis[J]. Journal of Southeast Univ: Medical Sci Ed, 2014, 33(6) |
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| Authors: | PI Ya-zhou HUA Zi-chun |
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| Keywords: | Raf kinase inhibitor protein expression purification metastasis |
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