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大鼠肝tRNA~(Ⅰle)基因的化学合成及克隆
作者姓名:钟雄霖!广州市510515  张璐!广州市510515  彭朝晖!广州市510515
作者单位:Institute of Molecular Biology,The First Military Medical University,Guangzhou,510515
摘    要:应用基因工程技术,设计并化合成了编码大鼠肝异亮氨酸转移RNA(tRNA~(Ⅰle))的基因。大鼠肝tRNA~(Ⅰle)基因由77bp组成。为了便于克隆与转录,在其5'端添加了BamHⅠ、SfiⅠ限制性内切酶位点及T7启动于序列,3'端添加了BstNⅠ及HindⅡ酶切位点,基因全长为120bp,被克隆至M13mp18载体上,再用之转染E.coliJM109.用分子杂交、PCR及酶切分析筛选出阳性克隆,序列分析证实与所设计的基因完全一致。大鼠肝tRNA~(Ⅰle)基因合成与克隆的成功,为进一步tRNA~(Ⅰle)功能与构象的研究打下基础。

关 键 词:  tRNA~(Ⅰle)基因  化学合成  克隆  大鼠
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