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| 抗γ-精浆蛋白人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的构建及导向筛选 | |
| 引用本文： | 张青,张思河,苏明权,杨洁,沈建军,郝晓柯.抗γ-精浆蛋白人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的构建及导向筛选[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2006,13(1):32-36. |
| 作者姓名： | 张青 张思河 苏明权 杨洁 沈建军 郝晓柯 |
| 作者单位： | 1. 第四军医大学西京医院检验科,西安,710032 2. 第四军医大学基础部细胞工程研究中心,西安,710032 3. 唐都医院肾脏内科西安,710032 |
| 基金项目： | 高比容电子铝箔的研究开发与应用项目 |
| 摘 要： | 目的:建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,筛选抗γ-精浆蛋白(γ-sm)人源性抗体轻链。方法:PCR扩增前列腺癌患者外周血淋巴细胞人抗体全套轻链基因,克隆人含鼠源抗γ-sm抗体Fd基因的pComb3X噬粒中,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库。通过稀释滴定、限制性酶切等分别对库容、基因重组率和多样性进行鉴定。以M13K07辅助噬菌体超感染,利用纯化的γ-sm对杂合库进行筛选,对筛出的阳性克隆进行功能检测。结果:构建了库容量为1．2×107CFU、重组率为90％、多样性好的人-鼠杂合噬菌体抗体库。ELISA检测出2个强阳性克隆,Western blot确证为抗γ--sm的人-鼠杂合Fab,竞争ELISA显示其表观亲和力约为亲本鼠抗体亲和力的71．8％。DNA测序显示筛到的人源轻链可变区基因属IGKV4-1*01胚系家族。结论:成功得到人源性抗γ-sm抗体轻链,为进一步获得全人源化抗体奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 噬菌体抗体库 导向筛选 前列腺癌 人源化 |
| 文章编号： | 1007-385X(2006)01-0032-05 |
| 收稿时间： | 2005-12-01 |
| 修稿时间： | 2006-01-20 |
Construction and guided-selection of mouse-human hybrid Fab phage antibody library against γ-seminoprotein |
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| ZHANG Qing,ZHANG Si-he,SU Ming-quan,YANG Jie,SHEN Jian-jun and HAO Xiao-ke.Construction and guided-selection of mouse-human hybrid Fab phage antibody library against γ-seminoprotein[J].Chinese Journal of Cancer Biotherapy,2006,13(1):32-36. | |
| Authors: | ZHANG Qing ZHANG Si-he SU Ming-quan YANG Jie SHEN Jian-jun and HAO Xiao-ke |
| Abstract: | |
| Keywords: | phage antibody library guide selection prostate cancer humanization |
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