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基因治疗帕金森病的分子生物学研究:神经营养因子Neurturin基因克隆及其真核表达
引用本文:张京钟,余爽,段德义,赵春礼,徐群渊.基因治疗帕金森病的分子生物学研究:神经营养因子Neurturin基因克隆及其真核表达[J].中国组织工程研究与临床康复,2005,9(5):64-66.
作者姓名:张京钟  余爽  段德义  赵春礼  徐群渊
作者单位:首都医科大学北京神经科学研究所,北京市神经再生修复研究重点实验室,北京市,100054
基金项目:国家自然科学基金(30270433),北京市教育委员会科技发展计划(KM200310025092),北京市科技新星计划(020820650120),北京市优秀人才专项经费资助项目
摘    要:目的:克隆中国人Neurturin基因,重组携带Neurturin基因的真核表达载体,为研究Neurturin基因治疗帕金森病提供分子生物学基础。方法:实验于2003-03/2004-05在北京市神经再生修复研究重点实验室完成。采用RT-PCR方法从人胎儿脑中获取NeurturincDNA,将其克隆至pGEM-Easy-T载体中。测序鉴定后,重组携带Neurturin基因的反转录病毒载体pLPCX-Neurturin;通过脂质体将重组载体转染PT67包装细胞系,用病毒上清感染NIH3T3细胞系以检测病毒滴度。结果:RT-PCR扩增到人NeurturincDNA片段,序列与Genebank登录的序列一致;将Neurturin基因亚克隆至反转录病毒载体得到插入方向正确的重组载体pLPCX-Neurturin,病毒上清滴度为5×104CFU/mL。结论:获得人Neurturin基因cDNA序列,检测到Neurturin基因在真核细胞中表达,并得到较高滴度的病毒上清。

关 键 词:帕金森病  克隆  分子  基因表达
文章编号:1671-5926(2005)05-0064-03
修稿时间:2004年11月10

Study of molecular biology on gene treatment for Parkinson disease: clone of human neurturin gene in neurotrophic factor and expression of eukaryotic cells
Zhang Jing-zhong,Yu Shuang,Duan De-yi,Zhao Chun-li,Xu Qun-yuan.Study of molecular biology on gene treatment for Parkinson disease: clone of human neurturin gene in neurotrophic factor and expression of eukaryotic cells[J].Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,2005,9(5):64-66.
Authors:Zhang Jing-zhong  Yu Shuang  Duan De-yi  Zhao Chun-li  Xu Qun-yuan
Abstract:
Keywords:
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