| 小鼠IL-33的原核表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 柳晓金,李明才,郑晓璇,武燕,曾俍铭,,苏绍波.小鼠IL-33的原核表达、纯化及鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志,2009,25(6). |
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| 作者姓名： | 柳晓金 李明才 郑晓璇 武燕 曾俍铭 苏绍波 |
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| 作者单位： | 汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所,广东,汕头,515041 |
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| 摘 要： | 目的: 在大肠杆菌中表达具有生物学活性的白细胞介素-33(mIL-33).方法: 用PCR技术扩增小鼠IL-33成熟蛋白的编码区, 与原核表达载体pET-44连接, 构建pET-44-mIL-33表达载体, 转化大肠杆菌BL21(DE3), IPTG诱导表达, 镍柱亲和层析法纯化目的蛋白, SDS-PAGE分析表达产物, MTT法测定纯化IL-33的生物学活性.结果: 成功构建了pET-44-mIL-33原核表达载体, 并在大肠杆菌中表达出可溶性mIL-33, SDS-PAGE分析纯化产物纯度为95%, 表达产量为95 mg/L.细胞增殖实验表明IL-33有抑制P815细胞增殖的活性.结论: 获得了有活性的重组IL-33蛋白纯品, 为后续功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 白细胞介素-33 镍柱亲和层析 原核表达 重组 |
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