| 人源抗-HBs轻链与干扰素-α融合蛋白的克隆及表达 |
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| 引用本文： | 陆慧琦,韩焕兴,安峰,叶伟民,曾万杰,薛菖.人源抗-HBs轻链与干扰素-α融合蛋白的克隆及表达[J].中华传染病杂志,2005,23(4):229-232. |
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| 作者姓名： | 陆慧琦 韩焕兴 安峰 叶伟民 曾万杰 薛菖 |
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| 作者单位： | 200003,上海,第二军医大学附属长征医院实验诊断科 |
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| 摘 要： | 目的构建人源单克隆抗-HBs Fab片段-IFNα表达载体，对原核表达该融合蛋白的可行性及其效果进行实验研究。方法用聚合酶链反应（PCR）体外扩增目的基因IFN—α，单酶点插入已含人源抗HBs Fab基因的载体，插入点位于轻链基因3’末端，利用酶切、PCR鉴定，测序筛选正确插入的阳性克隆，转化大肠埃希菌Top10．挑选单克隆表达、纯化目的蛋白，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测融合蛋白的抗原性，用Dotblot和WISH细胞检测其生物学活性。结果利用插入了人源抗-HBs Fab段基因及IFN-α基因的pBAD／gⅢA原核表达系统，成功表达了具生物活性的轻链与IFN-α的融合蛋白，其与HBsAg的亲合力与抗-HBs—Fab相近，而且具有干扰素的活性。融合蛋白对HepG2．2．15细胞初步实验结果亦显示出其具有良好的靶向性及致凋亡作用。结论轻链与干扰素IFN—α融合蛋白的成功表达表明，应用原核系统能够同时表达特异抗体和其介导的某些生物活性因子，不失为一种经济、有效的方法，为特异抗体及其介导融合蛋白的制备和临床应用提供了实验依据。
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| 关 键 词： | 干扰素α 肝炎表面抗原 乙型 重组融合蛋白质类 HepG2．2．1 5细胞 |
| 收稿时间： | 2004-08-18 |
| 修稿时间： | 2004年8月18日 |
Construction and expression of the fusion protein consisting of IFN-α and the L chain of antibody against HBsAg |
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| LIU Hui-qi , HAN Huanxing , AN Feng ,et al..Construction and expression of the fusion protein consisting of IFN-α and the L chain of antibody against HBsAg[J].Chinese Journal of Infectious Diseases,2005,23(4):229-232. |
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| Authors: | LIU Hui-qi HAN Huanxing AN Feng |
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| Institution: | Clinical Immunology Center of PLA , Changzheng Hospital, Shanghai 200003. China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interferon alpha Hepatitis B surface antigens Fusion proteins recombinant HepG2 2 15 |
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