| 人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 彭智,贾振华,唐红伟,黄海华,郭晓瑞,韦有万,王香梅,张培华. 人端粒酶催化亚基反义RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2012, 16(2): 311-314. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.02.028 |
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| 作者姓名： | 彭智 贾振华 唐红伟 黄海华 郭晓瑞 韦有万 王香梅 张培华 |
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| 作者单位： | 广东医学院附属医院整形外科,广东省湛江市,524001 |
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| 摘 要： | 背景:人端粒酶催化亚基与c-myc在喉鳞状细胞癌中有密切的相关性。目的:构建含有c-myc启动子的人端粒酶催化亚基的重组腺病毒载体,观察人端粒酶催化亚基在细胞中表达后对细胞增长的影响。方法:按照人工合成中反向转录的方法设计基因合成引物,用复式PCR获得目的片段ashTERT(322bp)。将片段ashTERT克隆到pUC57(2.7kb)克隆载体,然后热激转化到E.coli感受态细胞中,菌检、PCR、鉴定阳性克隆后,菌液放大培养,提取质粒pUC57-ashTERT,然后对质粒进行测序。将目的基因片段亚克隆到穿梭载体pshuttle-CMVneo上,然后构建重组腺病毒质粒pAd-ashTERT。转入293细胞中进行病毒包装、鉴定和滴度测定。结果与结论:提取质粒pUC57-ashTERT,测序符合序列要求。质粒pUC57-ashTERT转入293细胞后,成功构建了有较强感染能力的含人端粒酶催化亚基基因的重组腺病毒载体。
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| 关 键 词： | 人端粒酶催化亚基 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 腺病毒 基因治疗 |
Construction and identification of recombinant adenovirus vector of human telomerase reverse transcriptase |
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| Peng Zhi,Jia Zhen-hua,Tang Hong-wei,Huang Hai-hua,Guo Xiao-rui,Wei You-wan,Wang Xiang-mei,Zhang Pei-hua. Construction and identification of recombinant adenovirus vector of human telomerase reverse transcriptase[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2012, 16(2): 311-314. DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.02.028 |
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| Authors: | Peng Zhi Jia Zhen-hua Tang Hong-wei Huang Hai-hua Guo Xiao-rui Wei You-wan Wang Xiang-mei Zhang Pei-hua |
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| Affiliation: | Department of Plastic Surgery, Affiliated Hospital of Guangdong Medical University, Zhanjiang 524001, Guangdong Province, China |
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| Abstract: | |
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