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大叶蛇葡萄类纤维素合成酶基因的克隆及其序列分析
引用本文:蒲天珍,张秀桥,周佩娜,熊晓妹,龚玲.大叶蛇葡萄类纤维素合成酶基因的克隆及其序列分析[J].中国实验方剂学杂志,2019,25(20):147-152.
作者姓名:蒲天珍  张秀桥  周佩娜  熊晓妹  龚玲
作者单位:湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065,湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065,湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065,湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065,湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065
基金项目:湖北省教育厅中青年人才项目(Q20182003)
摘    要:目的:从药用植物大叶蛇葡萄Ampelopsis megalophylla中克隆得到类纤维素合酶(Cellulose synthase-like,Csl)基因(Am Csl)全长,并对序列进行生物信息学分析。方法:根据大叶蛇葡萄A. megalophylla转录组测序数据得到的Am Csl基因序列设计特异引物,以嫩叶总RNA逆转录的c DNA为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增Am Csl基因全长,并进行TA克隆测序,利用多种软件对该序列进行生物信息学分析。结果:Am Csl全长c DNA为1 438 bp,包含1个561 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码186个氨基酸,蛋白质分子式为C_(1011)H_(1547)N_(233)O_(257)S_(10),理论相对分子质量为22. 40 k Da,理论等电点(PI)为7. 59,脂肪族指数(AI)为116. 88,存在跨膜区,无信号肽,可能定位于内质网膜,平均疏水系数为0. 670,不稳定指数为42. 56,属于疏水性不稳定蛋白,保守结构域包含了1个纤维素合成酶超家族结构域,二级结构以α-螺旋为主。氨基酸多序列比对和系统进化树分析发现,Am Csl与同科植物葡萄有较高的同源性。结论:获得了大叶蛇葡萄Am Csl基因的全长,对其进行了初步的生物信息学分析,为进一步研究大叶蛇葡萄多糖的积累和生物合成的调控奠定了必要基础。

关 键 词:大叶蛇葡萄  类纤维素合成酶  基因克隆  生物信息学分析
收稿时间:2019/1/16 0:00:00

Cloning and Sequence Analysis of Cellulose Synthase-like Gene from Ampelopsis megalophylla
PU Tian-zhen,ZHANG Xiu-qiao,ZHOU Pei-n,XIONG Xiao-mei and GONG Ling.Cloning and Sequence Analysis of Cellulose Synthase-like Gene from Ampelopsis megalophylla[J].China Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2019,25(20):147-152.
Authors:PU Tian-zhen  ZHANG Xiu-qiao  ZHOU Pei-n  XIONG Xiao-mei and GONG Ling
Institution:Pharmacy Faculty, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China,Pharmacy Faculty, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China,Pharmacy Faculty, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China,Pharmacy Faculty, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China and Pharmacy Faculty, Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China
Abstract:
Keywords:Ampelopsis megalophylla  cellulose synthase-like  gene clone  bioinformatics analysis
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