辐射暴露后HIF-1α介导的胰腺外分泌细胞能量代谢变化研究

目的 阐明胰腺外分泌细胞辐射损伤后线粒体损伤情况、能量代谢变化及其可能机制。方法 大鼠胰腺外分泌细胞AR42 J分为照射组与空白对照组，照射组予单次6 Gy X射线照射，空白对照组未做处理。分别检测24、48、72、96 h线粒体膜电位，24及48 h三磷酸腺苷（ATP）产生量、乳酸产生量，24 h活性氧（ROS）产生量；行免疫印迹试验检测辐照后24 h应激及能量代谢相关因子HIF-1α、LDHA、PDH表达情况。大鼠按照随机数表法分为照射组和对照组。对照组给予12 Gy X射线照射，对照组予假照射（0 Gy），每组4只。实验结果经动物体内实验进一步验证。结果 与对照组相比，照射组细胞在接受辐照后24~96 h，线粒体膜电位呈进行性下降（t=5.438~17.687，P<0.05），24及48 h ATP产生量下降（q=17.300、8.328，P<0.05），乳酸产生量升高（q=21.790、16.250，P<0.05），24 h ROS产生量升高（t=7.935，P<0.05）；辐照促使缺氧诱导因子HIF-1α表达显著升高，介导糖酵解的关键因子LDHA显著升高，PDH表达下调，应用小干扰RNA技术沉默HIF-1α表达在一定程度上消除了辐照诱导的上述蛋白表达的变化。这些结果得到动物体内实验的验证。结论 胰腺外分泌细胞在电离辐射应激下，通过上调HIF-1α表达，促使能量代谢方式发生转变，糖酵解途径加强，而经线粒体的有氧氧化受到抑制。