| 重组人肝细胞生长因子-NK4腺病毒的制备及初步鉴定 |
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| 引用本文： | 石慧,陈德基,刘启才.重组人肝细胞生长因子-NK4腺病毒的制备及初步鉴定[J].中华生物医学工程杂志,2006,12(4). |
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| 作者姓名： | 石慧 陈德基 刘启才 |
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| 作者单位： | 1. 510260,广州医学院第二附属医院放射科
2. 广州医学院实验医学研究中心 |
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| 基金项目： | 广东省科技厅社会发展科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的 制备表达人肝细胞生长因子(HGF)-NK4蛋白的复制缺陷型重组腺病毒.方法 酶切pcDNA3-hNK4质粒获得NK4基因编码区序列并克隆至穿梭载体构建重组pAdTrack-CMV-NK4载体,线性化后与pAdEasy-1共转化BJ5183,通过同源重组得到重组pAd-NK4病毒载体.将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒,用病毒悬液感染人肝癌细胞株HepG2.RT-PCR法检测感染肿瘤细胞中NK4 mRNA表达.结果 酶切鉴定得到阳性pAd-NK4重组腺病毒载体,该载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装.在转染2d后能观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达.制备的Ad- NK4在体外能有效感染HepG2细胞并获得NK4基因高水平表达.结论 成功构建了NK4基因的重组腺病毒载体并制备重组腺病毒颗粒,为进一步研究NK4基因的功能及应用NK4进行基因治疗提供实验依据.
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| 关 键 词： | 复制缺陷型腺病毒 同源重组 NK4基因 基因治疗 |
Construction and idenfication of replication deficient recombinant adenovirus of NK4 protein |
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| SHI Hui,CHEN De-ji,LIU Qi-cai.Construction and idenfication of replication deficient recombinant adenovirus of NK4 protein[J].Chinese Journal of Biomedical Engineering,2006,12(4). |
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| Authors: | SHI Hui CHEN De-ji LIU Qi-cai |
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