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人脐静脉内皮细胞体外培养方法的改进
引用本文:陈春烨,易龙,金鑫,于斌,舒芙蓉,糜漫天.人脐静脉内皮细胞体外培养方法的改进[J].重庆医学,2008,37(17).
作者姓名:陈春烨  易龙  金鑫  于斌  舒芙蓉  糜漫天
作者单位:第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038;第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038;第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038;第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038;第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038;第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆,400038
摘    要:目的 建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞(HUVECS)的体外培养方法,为血管内皮细胞的大规模体外实验研究奠定基础.方法 比较0.25%胰酶、0.1%Ⅰ型胶原酶、0.25%胰酶与0.1%Ⅰ型胶原酶(1∶1)3种消化方法分离HUVECs的细胞数量和活细胞率的差异.观察血管内皮细胞生长因子(VEGF)对细胞生长的影响.细胞鉴定采用形态学观察和免疫荧光法检测.结果 0.1%Ⅰ型胶原酶单独或混合0.25%胰酶消化分离细胞数量较多、活细胞率较高(P<0.05).VEGF能明显促进细胞增殖能力,延长细胞自然生长时间.细胞呈单层"铺路石"样排列,免疫荧光细胞化学法染色,激光买聚焦检测可见胞质中绿色荧光颗粒.结论 Ⅰ型胶原酶与胰酶混合消化HUVECs是获取血管内皮细胞的一种经济且效果较好的方法,添加VEGF能明显促进细胞增殖,可用于构建体外研究血管内皮细胞的模型.

关 键 词:脐静脉  内度细胞  细胞培养

Improvement of human umbilical vein endothelial cells culture in vitro
CHEN Chun-ye,YI Long,JIN Xin,et al..Improvement of human umbilical vein endothelial cells culture in vitro[J].Chongqing Medical Journal,2008,37(17).
Authors:CHEN Chun-ye  YI Long  JIN Xin  
Institution:CHEN Chun-ye,YI Long,JIN Xin,et al.(Department of Nutrition , Food Hygiene,Institute of Military Preventive Medicine,The Third Military Medical University,Chongqing Key Laboratory of Nutrition , Food Safety,Chongqing 400038,China)
Abstract:
Keywords:umbilical vein  endothelial cells  cell culture  
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