热休克处理对视网膜色素上皮细胞氧化损伤的保护作用

目的研究热休克预处理对热休克蛋白27（HSP27）在视网膜色素上皮细胞（RPE）中表达的影响,探讨热休克预处理对RPE氧化损伤的保护作用及其机制。方法培养的RPE随机分成正常对照组、热休克预处理组、H₂O₂损伤组及热休克预处理加H₂O₂损伤组,将热休克预处理、热休克预处理加H₂O₂损伤组细胞置于42℃水浴中孵育20min进行热休克处理,于37℃体积分数5%CO₂细胞培养箱中继续培养,分别于0h,2h,4h,8h,12h,24h后终止培养,用于实验。H₂O₂损伤组及热休克预处理加H₂O₂损伤组细胞600μmol·L^-1H₂O₂处理造成RPE氧化损伤模型;应用免疫细胞化学法检测热休克预处理前后细胞HSP27的表达;流式细胞术检测H₂O₂损伤前后RPE的凋亡情况。结果热休克预处理后RPE HSP27表达出现不同程度增高,与对照组比较,预处理后4h及8h组表达明显增强,Q值分别为9.9133,11.6842,P<0.01;流式细胞仪分析检测结果显示,H₂O₂可以显著降低细胞的活性,与对照组比较,Q值为51.7561,P<0.01。热休克预处理后的RPE表现出时H₂O₂损伤的耐受性,与H₂O₂损伤组比较,预处理后4h加H₂O₂损伤组及8h加H₂O₂损伤组RPE凋亡率明显降低,Q值分别为24.1271,25.5848,P<0.01,且程度与细胞中HSP27表达高低呈一定的相关性（r=-0.9856,P<0.01）。结论热休克预处理可诱导RPE HSP27的高表达并能明显减轻RPE的H₂O₂损伤,其机制可能主要是通过高表达的HSP27保护RPE抑制其凋亡来实现。