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人p27kip1可调控性重组腺病毒载体的构建及其在PC-3细胞中的表达
引用本文:邱镇,孙颖浩,许传亮,王元天,沈茜,钱松溪,顾正勤,李云,Chinlee Wu. 人p27kip1可调控性重组腺病毒载体的构建及其在PC-3细胞中的表达[J]. 第二军医大学学报, 2003, 24(11): 1200-1203
作者姓名:邱镇  孙颖浩  许传亮  王元天  沈茜  钱松溪  顾正勤  李云  Chinlee Wu
作者单位:1. 第二军医大学长海医院泌尿外科,上海,200433
2. 长海医院中心实验室
3. Department of Pathology Massachusetts General Hospital Bigelow 1102,55 Fruit Street,Boston,MA 2114-2696,USA
基金项目:国家自然科学基金,军队医药科研规划项目,30110665,01Z067,,
摘    要:目的:体外构建人p27kip1可调控性重组腺病毒载体,并观察其在前列腺癌细胞系PC-3细胞中的表达及其对细胞生长的影响.方法:采用Ad-X Tet-Off表达系统,将人全长p27kip1 cDNA经过穿梭载体,与可调控性腺病毒载体骨架连接,得到重组人p27kip1基因腺病毒(Ad-p27kip1),在HEK293细胞包装、扩增,获得高滴度病毒,采用空斑试验测定病毒滴度,体外转染PC-3细胞,RT-PCR、Western 杂交分别检测目的基因不同水平的表达,并通过MTT法观察转染前后细胞增殖力的变化.Ad-X-TRE-β gal病毒作为对照.结果:构建的Ad-p27kip1病毒滴度为1.2×109 pfu/ml,RT-PCR、Western 杂交检测有特异的高表达,转染后对细胞的生长有抑制作用.结论:体外连接法成功地构建携带人p27kip1基因的可调控性重组腺病毒载体,在人前列腺癌细胞系PC-3中有高表达并对细胞生长有抑制作用.

关 键 词:人p27^kip1 可调控性重组腺病毒载体 PC-3细胞 前列腺癌 细胞生长
文章编号:0258-879X(2003)11-1200-04
修稿时间:2003-03-19

Construction of regulatory human p27kip1 recombinant adenovirus vector and its expression in human prostate cancer cell line PC-3
Chinlee Wu. Construction of regulatory human p27kip1 recombinant adenovirus vector and its expression in human prostate cancer cell line PC-3[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2003, 24(11): 1200-1203
Authors:Chinlee Wu
Abstract:
Keywords:p27kip1
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