|
|||||
|
|
| 靶向激活蛋白激酶PKR诱导白血病K562细胞凋亡 | |
| 引用本文： | 白卫君,王小中,曾建明,赵世巧,温健萍,肖青,曹唯希,黄宗干,冯文莉. 靶向激活蛋白激酶PKR诱导白血病K562细胞凋亡[J]. 肿瘤, 2009, 29(1). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.01.008 |
| 作者姓名： | 白卫君 王小中 曾建明 赵世巧 温健萍 肖青 曹唯希 黄宗干 冯文莉 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学临床血液学教研室,临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016 2. 加拿大血液服务中心,汉密尔顿,22373 3. 重庆医科大学临床学院血液科,重庆,400016 |
| 摘 要： | 目的: 采用双链RNA能激活细胞内蛋白激酶PKR引起细胞凋亡的策略,研究重组慢性粒细胞白血病独特的bcr/ab1 b3a2型外源反义RNA诱导白血病K562细胞的凋亡及其作用机制.方法: 用含bcr/abl融合基因序列40 bp的反转录病毒载体RV-40AS作用于白血病K562细胞,以光学显微镜、电子显微镜、FCM法和DNA梯状条带法检测细胞凋亡情况,化学比色法检测caspase-8和caspase-9活性变化,RT-PCR法检测Bax、Bcl-2 mRNA表达变化,并以Western印迹法检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)、磷酸化PKR(p-PKR)、Bax和Bcl-2的蛋白变化.结果: RV-40AS作用K562细胞组在光学显微镜下出现胞体皱缩、染色质浓集以及折光性减弱,电子显微镜下可见细胞质电子密度增大、核固缩和出现凋亡小体;FCM法检测到凋亡细胞占(22.70±1.42)%[未处理组(3.24±0.66)%],DNA电泳出现典型的梯状条带;caspase-8和caspase-9活性升高,PKR蛋白无明显变化,但p-PKR水平升高;Bax的mRNA和蛋白表达均升高,而Bcl-2mRNA和蛋白表达水平没有明显变化.对照组和PKR抑制剂处理组均未发生上述改变.结论: bcr/abl反义RNA反转录病毒载体RV-40AS可特异性激活PKR,从而诱导白血病K562细胞发生凋亡,其可能的机制是PKR活化激活了凋亡反应的上游分子caspase-8,并通过上调Bax表达水平、降低Bcl-2/Bax的比值,导致线粒体膜稳定性被破坏,促使凋亡小体形成和caspase-9活化,最终激活其他凋亡分子使细胞发生凋亡. |
| 关 键 词： | 白血病 蛋白激酶类 细胞凋亡 K562细胞 |
Targeted activation of protein kinase PKR induced apoptosis of leukemia K562 cells |
|
| BAI Wei-jun,WANG Xiao-zhong,ZENG Jian-ming,ZHAO Shi-qiao,WEN Jian-ping,XIAO Qing,CAO Wei-xi,HUANG Zong-gan,FENG Wen-li. Targeted activation of protein kinase PKR induced apoptosis of leukemia K562 cells[J]. Tumor, 2009, 29(1). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2009.01.008 | |
| Authors: | BAI Wei-jun WANG Xiao-zhong ZENG Jian-ming ZHAO Shi-qiao WEN Jian-ping XIAO Qing CAO Wei-xi HUANG Zong-gan FENG Wen-li |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录！ | |