| 人结核杆菌热休克蛋白65和Ag85A基因真核双表达质粒的构建和体外表达 |
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| 引用本文： | 马彦彬,戴五星,陈智浩,高红.人结核杆菌热休克蛋白65和Ag85A基因真核双表达质粒的构建和体外表达[J].华中医学杂志,2008,32(3). |
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| 作者姓名： | 马彦彬 戴五星 陈智浩 高红 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学系,武汉,430030 |
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| 摘 要： | 目的构建人结核杆菌热休克蛋白65（Hsp65）与Ag85A基因的共表达载体pIRES-Hsp65-Ag85A,并检测其在体外的表达。方法利用聚合酶链反应（PCR）法及基因重组技术,以人结核杆菌基因组DNA为模板,扩增获得Hsp65与Ag85A的全长基因,并将其构建到真核表达质粒pIRES中获得共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A。将该质粒转染Hela细胞,通过RT-PCR的方法检测目的基因的表达。结果经过测序证实重组质粒构建成功,该质粒在体外转染Hela细胞后可表达Hsp65与Ag85A两者的mRNA。结论成功构建了共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A,该质粒能在人子宫颈癌细胞中表达。
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| 关 键 词： | 热休克蛋白65 结核分枝杆菌 Ag85A基因 共表达载体 |
Construction and expression of eukaryotic co-expression plasmid containing Mycobacterium tuberculosis Hsp65 and Ag85A genes |
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