| AAV-TGFβ1的构建及其与AV-TGFβ1对髓核细胞蛋白多糖合成影响的比较 |
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| 引用本文： | 赛佳明,胡有谷,王德春.AAV-TGFβ1的构建及其与AV-TGFβ1对髓核细胞蛋白多糖合成影响的比较[J].中国骨与关节损伤杂志,2008,23(2):116-118. |
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| 作者姓名： | 赛佳明 胡有谷 王德春 |
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| 作者单位： | 青岛大学医学院附属医院骨科,山东省创伤骨科研究所,山东省青岛市,266021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30271318) |
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| 摘 要： | 目的探讨转化生长因子β1腺相关病毒表达系统(AAV-TGFβ1)的构建及其与转化生长因子β1腺病毒表达系统(AV-TGFβ1)对髓核细胞蛋白多糖合成影响的比较。方法采用PCR技术扩增转化生长因子β1(TGFβ1)基因,并于其两端分别连接EcoRI和SalI酶切位点。将TGFβ1基因亚克隆于腺相关病毒(AAV)载体中,并经酶切和测序分析进行鉴定。AAV-TGFβ1病毒被包装并转染H293细胞,通过免疫荧光检测AAV介导的目的基因表达。利用AAV-EGFP病毒检测AAV对髓核细胞的转染效率。AAV-TGFβ1和AV-TGFβ1分别转染髓核细胞后,通过Antonopulos法检测蛋白多糖的合成。结果测序分析证明TGFβ1序列与NCBI Gene Bank所报道的一致。经酶切鉴定证实AAV-TGFβ1重组质粒被成功构建。AAV可介导TGFβ1高效表达并高效转染髓核细胞。AV-TGFβ1可快速一过性地促进髓核细胞蛋白多糖合成,而AAV-TGFβ1可稳定促进蛋白多糖合成。结论AAV-TGFβ1病毒被成功构建并可稳定地促进髓核细胞蛋白多糖的合成。
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| 关 键 词： | 腺相关病毒 腺病毒 转化生长因子β1 髓核 蛋白多糖 |
| 收稿时间： | 2007-10-24 |
| 修稿时间： | 2007年10月24 |
Construction of AAV-TGFβ1 and Comparision of Its Biological Effects on Proteoglycan Synthesis of Nucleus Pulpous Cells with AV-TGFβ1 |
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| Sai Jiaming,Hu Yougu,Wang Dechun.Construction of AAV-TGFβ1 and Comparision of Its Biological Effects on Proteoglycan Synthesis of Nucleus Pulpous Cells with AV-TGFβ1[J].Chinese Journal of Bone and Joint Injury,2008,23(2):116-118. |
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| Authors: | Sai Jiaming Hu Yougu Wang Dechun |
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