| 类鼻疽伯克霍氏德氏菌UDPE检测方法的建立和应用 |
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| 引用本文： | 宋亚军,王津等. 类鼻疽伯克霍氏德氏菌UDPE检测方法的建立和应用[J]. 中国人兽共患病杂志, 2001, 17(2): 35-37 |
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| 作者姓名： | 宋亚军 王津等 |
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| 作者单位： | [1]国家生物医学分析中心分析微生物实验室,军事医学科学 [2]国家生物医学分析中心分析微生 |
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| 摘 要： | 目的：建立防止产物污染的UDPE（UDG－Duplex PCR－EIA）技术,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法：选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR（Ferric Uptake Reg ulator）基因为靶序列,设计两对引物进行PCR扩增,用UDG（尿嘧啶糖基化酶）防止PCR产物污染,并用微孔板杂交－酶联显色检测扩增的PCR产物片段;用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果：该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌;对于纯DNA模板,检测灵敏度可以达到10fg/μl;对于系列稀释菌液提取的模板,灵敏度可达0.1个菌／μl;对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为10个菌／μl,100个菌／μl和100个菌／μl;检测系统可以防止10^9个PCR产物分子的污染;检测系统可以在37℃下稳定保存7d。结论：本研究建立了稳定的,防止产物污染,灵敏度特异性均较理想的类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测系统。
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| 关 键 词： | 类鼻疽伯克霍尔德氏菌 尿嘧啶糖基化酶 UDG PCR 微孔板杂交 UDPE |
| 文章编号： | 1002-2694(2000)02-35-03 |
| 修稿时间： | 2000-11-28 |
AN UDPE ASSAY FOR RAPIDAND SENSITIVE DETECTION OF B URKHOLDEIA PSE UDOMALLEI |
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| SONG Yajun,WANG Jin,ZHANG Minli,et al. AN UDPE ASSAY FOR RAPIDAND SENSITIVE DETECTION OF B URKHOLDEIA PSE UDOMALLEI[J]. Chinese Journal of Zoonoses, 2001, 17(2): 35-37 |
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| Authors: | SONG Yajun WANG Jin ZHANG Minli et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Burkholderia pseudomallei UDG(Uracil DNA Glycosylase) PCR Microwell plate |
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