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日本血吸虫重组SjTsp2/Sj29 ku蛋白疫苗对小鼠免疫效果的研究
引用本文:雷娜,刘淼,任翠平,刁玉洁,杨菲,程海燕,沈际佳. 日本血吸虫重组SjTsp2/Sj29 ku蛋白疫苗对小鼠免疫效果的研究[J]. 安徽医科大学学报, 2014, 0(10)
作者姓名:雷娜  刘淼  任翠平  刁玉洁  杨菲  程海燕  沈际佳
作者单位:1. 安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室,合肥230032; 安徽医学高等专科学校,合肥 230022
2. 安徽医科大学基础医学院病原生物学教研室,合肥,230032
基金项目:国家自然科学基金项目,安徽省大学生创新训练项目
摘    要:目的探讨日本血吸虫重组Tsp2/Sj29 ku表膜蛋白疫苗对小鼠的抗病免疫效果。方法 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku重组菌经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷( IPTG)诱导表达,制备纯化的重组蛋白。29只6周龄雌性昆明鼠随机分为蛋白疫苗组、硫氧还蛋白组和空白对照组,前两组各10只,空白对照组9只。蛋白疫苗组,第一次免疫每鼠经背部皮下多点注射用等体积弗氏完全佐剂乳化的50μg SjTsp2/Sj29 ku重组表膜蛋白,第12、24天每鼠皮下多点再次注射用等体积弗氏不完全佐剂乳化的50μg该重组蛋白。硫氧还蛋白组的免疫方法同蛋白疫苗组。空白对照组用生理盐水代替蛋白,免疫方法同前。末次免疫后第10天,每鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴(30±2)条。于感染45 d后剖杀全部实验小鼠,计算减虫率和减卵率。眼眶取血,分离血清,间接性ELISA法检测IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgM抗体亚型,同时检测血清细胞因子γ干扰素( IFN-γ)、白介素4( IL-4)水平。结果 pet32a/SjTsp2/Sj29 ku菌经IPTG诱导可大量表达,经变性、复性获得纯化的日本血吸虫Tsp2/Sj29 ku重组表膜蛋白。蛋白疫苗组与空白对照组比较,减虫率和减卵率显著升高( P<0.05)。硫氧还蛋白组与空白对照组之间比较,减虫率和减卵率差异均无统计学意义( P>0.05)。蛋白疫苗组小鼠血清中IgG1、IgG2a、IgG2b显著高于空白对照组(P<0.05),而IgG3和IgM较空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白疫苗组小鼠血清IFN-γ、IL-4细胞因子显著高于空白对照组( P<0.01)。结论日本血吸虫 Tsp2/Sj29 ku重组表膜蛋白疫苗对小鼠抗感染有一定的保护性;该重组蛋白免疫引起的是 Th1/Th2混合型免疫反应。

关 键 词:日本血吸虫  表膜蛋白  蛋白疫苗

Investigation of the anti-schistosomiasis effect of SjTsp2/Sj29 ku surface membrane protein from Schistosoma japonicum
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  surface membrane protein  protein vaccine
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