| 荧光定量RT-PCR技术分析人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠mRNA的表达 |
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| 引用本文： | 韦相才,马芸,邓新燕,卢丽,黄冰,陈系古.荧光定量RT-PCR技术分析人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠mRNA的表达[J].热带医学杂志,2005,5(6):729-733. |
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| 作者姓名： | 韦相才 马芸 邓新燕 卢丽 黄冰 陈系古 |
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| 作者单位： | 广东省计划生育科学技术研究所,广州,510600;中山大学实验动物中心,广州,510080;中山大学实验动物中心,广州,510080 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.399000063）;广东省科技计划重大项目（No.203078）. |
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| 摘 要： | 目的 采用荧光定量RT-PCR技术检测所制作的人地中海贫血β^654珠蛋白基因转基因小鼠模型mRNA的表达情况,评价该技术应用于小鼠mRNA分析的价值.方法 根据GenBank小鼠mRNA序列,设计用于扩增小鼠mRNA的引物和反向探针,构建荧光定量RT-PCR技术.实验分两组,分别对转基因小鼠和正常小鼠中mRNA进行检测.采用SPSS统计软件,分析和比较两组动物中mRNA的表达量及表达的稳定性.结果 所检测的11只转基因阳性小鼠中检测出人β^654珠蛋白基因mRNA和小鼠内源性mRNA;而在33只正常小鼠中只检测到小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术可检测到105拷贝数的人β^654珠蛋白基因mRNA和115拷贝数的小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术分别在F1代和F2转基因阳性小鼠中稳定地检测到,表明转基因小鼠mRNA获得稳定表达.结论 所构建的荧光定量RT-PCR技术分析转基因小鼠mRNA表达具有检测定量、敏感、高效快捷的特点,该方法在鉴定和评估转基因小鼠mRNA的表达中稳定性好、定量准确,具有非常重要的应用价值.
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| 关 键 词： | 荧光定量RT-PCR 人地中海贫血 β654珠蛋白基因 转基因小鼠 mRNA |
| 文章编号： | 1672-3619(2005)06-0729-05 |
| 收稿时间： | 02 21 2005 12:00AM |
| 修稿时间： | 05 26 2005 12:00AM |
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