| 白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株4龄幼虫cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 周国理,吴瑜,黄炯烈,陆家海,王玲.白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株4龄幼虫cDNA文库的构建[J].寄生虫与医学昆虫学报,2001,8(2):92-99. |
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| 作者姓名： | 周国理 吴瑜 黄炯烈 陆家海 王玲 |
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| 作者单位： | 中山医科大学寄生虫学教研室, |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目!(970 0 92 )，“2 11工程”重点学科建设基金资助项目!(9812 4) |
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| 摘 要： | 目的 :构建白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫cDNA文库。方法 :抽提、纯化白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫总RNA ,进行反转录合成第 1链cDNA ;用Clontech公司SMARTTM cDNA文库构建试剂盒进行长距离PCR ,合成全长双链cDNA ;PCR产物经蛋白酶K消化、提纯后 ,进行SfiI酶切 ;用ChromaSpin 40 0柱将酶切产物进行分级分离 ,然后经 1 1%琼脂糖凝胶电泳鉴定 ,回收 40 0bp以上的组分 ,并与λTriplEx2载体连接 ;连接产物经体外蛋白包装 ,产生未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库的扩增 ,并测定扩增文库的滴度 ;随机挑取 9个噬菌体 ,用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增 ,以检测所构建的cDNA文库的质量。结果 :经检测 ,未扩增文库滴度达 2 0× 10 7pfu mL ,重组效率在 10 -4 稀释度时每块平板约 2 10～ 2 5 5个噬菌斑中均未发现任何蓝色噬斑 ,扩增文库滴度达 1 75× 10 9pfu mL ;用载体克隆位点两端的引物进行PCR鉴定 ,结果显示 :所选 9个噬菌体中均含有重组的cDNA ,并且均在 5 0 0bp以上 ,其中 1kb以上的有 2个、 70 0bp的有 5个、 5 0 0bp的有 2个。结论 :已成功地获得一高质量的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 4龄幼虫cDNA文库。
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| 关 键 词： | 白纹伊蚊 杀虫剂抗性 cDNA文库 |
| 修稿时间： | 2000年7月17日 |
CONSTRUCTION OF A cDNA LIBRARY FROM THE 4~(th) INSTAR LARVAE OF DELTAMETHRIN-RESISTANT AEDES ALBOPICTUS |
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| Zhou Guoli,Wu Yu,Huang Jionglie,Lu Jiahai,Wang Ling.CONSTRUCTION OF A cDNA LIBRARY FROM THE 4~(th) INSTAR LARVAE OF DELTAMETHRIN-RESISTANT AEDES ALBOPICTUS[J].Acta Parasitologica et Medica Entomologica Sinica,2001,8(2):92-99. |
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| Authors: | Zhou Guoli Wu Yu Huang Jionglie Lu Jiahai Wang Ling |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Aedes albopictus Insecticide resistance cDNA library |
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