K型丙酮酸激酶的放射免疫测定 |
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引用本文: | 林元藻,邵明川.K型丙酮酸激酶的放射免疫测定[J].宜春医专学报,1985(1). |
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作者姓名: | 林元藻 邵明川 |
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作者单位: | 宜春医专生化教研室
(林元藻),上海一医生化教研室(邵明川) |
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摘 要: | 作者用自己提纯的K型丙酮酸激酶(K—PyK)和免抗K-pyk血清(Ab_1),设计与建立了K—PyK的放射免疫测定法(RIA).用乳汁过氧化物酶法标记K—PyK,经SēPhadexG—25柱层析制备高比放射性~(125)I—K—PyK(K—PyK~*),免疫活性良好.双抗体法分离抗体结合的和游离的K—PyK~*.通过实验建立起反应体系:牛血清白蛋白(BSA)稀释度为6%,最终工作浓度为1:10,000;选择总计数为20,000CPm/分左右的K—PyK*;最佳孵育PH7.0;孵育时间为24小时;反应体系中加入不稀释的第二抗体(Ab_2)和1:10的兔正常抗血清,沉淀反应良好.竞争抑制曲线的测定范围为40~5000ng.本法是灵敏、可靠和特异的.
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