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鳖甲煎改良方含药血清对肝星状细胞增殖、周期及凋亡的影响
引用本文:张荣华,闫国和,汪国建,粟永萍. 鳖甲煎改良方含药血清对肝星状细胞增殖、周期及凋亡的影响[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(8): 905-910. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201508093
作者姓名:张荣华  闫国和  汪国建  粟永萍
作者单位:1. 第三军医大学西南医院中西医结合科,重庆,400038;2. 400038重庆,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室,全军复合伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81273918),重庆市中医药科技项目(2012-2-63),军队中医药科研专项课题(2010ZYZ231) Supported by the General Program of National Nature Foundation of China (81273918)
摘    要:目的 探讨鳖甲煎改良方含药血清对大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)-T6增殖、周期及凋亡的影响.方法 分别用高剂量[28.4 g/(kg·d)]、中剂量[14.2g/(kg·d)]与低剂量[7.1 g/(kg·d)]的鳖甲煎改良方及与鳖甲煎改良方高剂量相同剂量的鳖甲煎丸灌胃大鼠以制备含药血清.将等体积不同剂量的鳖甲煎改良方含药血清分别处理HSC-T6细胞,以等体积鳖甲煎丸含药血清处理的细胞为阳性对照组,生理盐水处理的细胞为空白对照组,正常大鼠血清处理的细胞为正常对照组.CCK-8检测不同处理组HSC-T6细胞的增殖情况,并绘制其增殖曲线;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测经不同处理的HSC-T6细胞的周期,Annexin V-PI染色法检测其凋亡;在mRNA及蛋白水平分别检测经不同处理的HSC-T6细胞的增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)基因及其编码蛋白的表达变化.结果 CCK-8检测结果显示,鳖甲煎改良方含药血清对HSC-T6细胞增殖具抑制作用,高剂量与中剂量组的增殖速度慢于正常对照组、阳性对照组和空白对照组(P <0.05,P<0.01),且该抑制作用呈剂量-效应关系.FCM检测证实,鳖甲煎改良方含药血清可将HSC-T6细胞阻滞于S期,能诱导HSC-T6细胞的凋亡,与正常对照组比较,其凋亡诱导率差异具有统计学意义(P<0.01).mRNA与蛋白水平检测结果显示,与空白对照组和阳性对照组比较,高剂量组能在基因与蛋白水平显著下调HSC-T6细胞PCNA的表达.结论 鳖甲煎改良方含药血清能明显抑制HSC-T6细胞的增殖,诱导HSC-T6细胞的凋亡,并能下调其PCNA基因及其编码蛋白的表达.

关 键 词:鳖甲煎改良方  HSC-T6细胞  增殖  细胞周期  凋亡  增殖细胞核抗原

Effect of serum containing modified turtle shell decoction on proliferation,cell cycle and apoptosis of hepatic stellate cell line T6
Abstract:
Keywords:serum containing modified turtle shell decoction  hepatic stellate cell line T6  proliferation  cell cycle  apoptosis  proliferating cell nuclear antigen
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