| pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体构建、表达及其抗原递呈功能研究 |
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| 引用本文： | 张旭晖,何韦韦,谭文婷,但芸婕,李辉文,王勇,邓国宏. pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体构建、表达及其抗原递呈功能研究[J]. 第三军医大学学报, 2016, 0(9): 916-920. DOI: 10.16016/j.1000-5404.201512005 |
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| 作者姓名： | 张旭晖 何韦韦 谭文婷 但芸婕 李辉文 王勇 邓国宏 |
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| 作者单位： | 1. 400038重庆,第三军医大学西南医院全军感染病研究所,感染病研究重庆市重点实验室;2. 第三军医大学基础医学部实验动物学教研室,重庆,400038 |
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| 基金项目： | and the Project of Frontier and Application Basic Research Plan of Chongqing (CSTC2014jcyjA10114).国家自然科学基金重点项目(81330038)，重庆市前沿与应用基础研究计划项目(CSTC2014jcyjA10114) |
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| 摘 要： | 目的 构建可以表达人类HLA-DRB1*0803的转基因载体,并在细胞水平验证其表达及抗原递呈功能.方法 提取人WATANABE细胞株(基因型为HLA-DRB1 *0803纯合子)的总RNA,RTPCR扩增DRB1*0803基因片段,与小鼠Eα promoter和兔β-globin基因内含子序列同时导入pBR002-lacz载体.pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体转染小鼠DCS细胞和B细胞系,用Western blot和免疫荧光的方法对HLA-DRB1蛋白进行检测.流式细胞术检测转染小鼠DCS细胞对HBcAg特异性CD4+T细胞的刺激和极化效应.结果 经双酶切和测序验证,成功构建了pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体;转染载体后的小鼠DCS细胞和B细胞系均表达出了大小约为29×103的HLA-DRB1蛋白;免疫荧光结果表明HLA-DRB1蛋白主要表达于细胞质内.转染后的小鼠DCS细胞可将负载的HBcAg递呈给HLA-DRB1 *0803阳性基因型的人CD4+T细胞,产生明显的CD4+T细胞应答.结论 成功构建了HLA-DRB1 *0803转基因载体,该载体可以在细胞水平特异性表达HLA-DRB1蛋白,并具有HLA-DRB1*0803特异性抗原递呈功能.
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| 关 键 词： | HLA-DR 转基因载体 乙型肝炎病毒 抗原递呈 |
Construction of transgenic vector pBR002-HLA-DRB1*0803 and its expression and antigen-presenting function |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HLA-DR transgenic vector hepatitis B virus antigen presentation |
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