| 靶向survivin的siRNA表达载体的构建和表达及对HeLa细胞的影响 |
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| 引用本文： | 蒋鸿超,孙强明,赵丹,孙茂盛,吕琳,李鸿钧.靶向survivin的siRNA表达载体的构建和表达及对HeLa细胞的影响[J].南方医科大学学报,2006,26(12):1806-1811. |
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| 作者姓名： | 蒋鸿超 孙强明 赵丹 孙茂盛 吕琳 李鸿钧 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院/中国协和医科大学医学生物学研究所分子生物室,云南,昆明,650118;昆明医学院研究生部,云南,昆明,650031;中国医学科学院/中国协和医科大学医学生物学研究所分子生物室,云南,昆明,650118;昆明医学院研究生部,云南,昆明,650031 |
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| 摘 要： | 目的应用RNA干扰技术(RNAi)针对凋亡抑制因子survivin存活素的siRNA抑制Hela细胞株内源survivin基因的表达以及可促进Hela细胞凋亡。方法构建重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2并分别转染Hela细胞株,通过免疫荧光和半定量RT-PCR检测survivin蛋白表达及mRNA转录水平的变化,并通过流式细胞仪使用PI-AnnexinV双染法检测Hela细胞株的凋亡。结果构建的2种重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均能明显抑制survivin基因的表达;应用免疫荧光检测survivin基因的表达,转染重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2的实验组survivin荧光强度明显低于转染空载体pGE-1和pshRNA阴性非特异对照质粒;通过半定量RT-PCR检测到survivin基因mRNA转录明显减少;通过PI-AnnexinV双染法检测Hela细胞的凋亡分别达(36.02±2.12)%(P<0.01)和(35.29±2.02)%(P<0.01)。结论重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均可明显抑制Hela细胞内源survivin的表达和mRNA的转录均可并明显促进Hela细胞的凋亡,为survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法提供良好的实验基础。
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| 关 键 词： | siRNA Hela细胞株 survivin基因 质粒 表达 |
| 文章编号： | 1673-4254(2006)12-1806-06 |
| 收稿时间： | 2006-05-18 |
| 修稿时间： | 2006年5月18日 |
RNA interference-mediated inhibition of survivin expression in Hela cell line by siRNA expression vector targeting survivin gene |
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| JIANG Hong-chao,SUN Qiang-ming,ZHAO Dan,SUN Mao-sheng,L Lin,LI Hong-jun.RNA interference-mediated inhibition of survivin expression in Hela cell line by siRNA expression vector targeting survivin gene[J].Journal of Southern Medical University,2006,26(12):1806-1811. |
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| Authors: | JIANG Hong-chao SUN Qiang-ming ZHAO Dan SUN Mao-sheng L Lin LI Hong-jun |
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| Institution: | Department of Molecular Biology, Institute of Medical Biology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Kunming 650118, China. hongchaojiang@yahoo.com.cn |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | siRNA |
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