| 人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的人工合成及高效表达 |
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| 引用本文： | 徐霞,杨能,涂洪斌. 人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的人工合成及高效表达[J]. 免疫学杂志, 2005, 21(4): 320-322,326 |
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| 作者姓名： | 徐霞 杨能 涂洪斌 |
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| 作者单位： | 广州医学院,检验系,广州,510182;广州医学院,实验医学研究中心,广州,510182 |
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| 基金项目： | 广东省医学科学技术研究基金资助项目(A2000265) |
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| 摘 要： | 目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白I(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达。方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技术将其插入温控型表达载体pBV220,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,构建cTnI基因的非融合表达菌hcTnI-pBV220/DH5α,热激后诱导非融合蛋白的表达,用单克隆抗体检测特异性hcTnI蛋白表达。结果序列分析表明克隆载体中的cTnI人工基因与设计相符,双酶切电泳结果证明表达载体构建成功,经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量(Mr)约24000,凝胶密度扫描约占菌体总蛋白的25%,能与cTnI单克隆抗体特异性结合。结论成功获得cTnI人工基因,构建了cTnI基因原核表达载体并获得了高效表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 肌钙蛋白Ⅰ 密码子偏爱性 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-8861(2005)04-0320-04 |
Cloning and overexpression of human cardiac troponin I gene |
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| XU Xia,YANG Neng,TU Hong-bin. Cloning and overexpression of human cardiac troponin I gene[J]. Immunological Journal, 2005, 21(4): 320-322,326 |
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| Authors: | XU Xia YANG Neng TU Hong-bin |
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| Affiliation: | XU Xia~a,YANG Neng~a,TU Hong-bin~b |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cardiac troponin I Codon bias Cloning Expression |
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