沉默GLUT-1表达对食管鳞癌细胞株TE-13增殖和迁移的影响

目的：研究沉默葡萄糖转运蛋白-1（glucose transporter protein-1，GLUT-1）的表达对食管鳞癌TE-13细胞增殖、周期及迁移的影响及可能的作用机制。方法采用慢病毒感染的方法将特异性针对GLUT-1基因的GLUT-1-shRNA转入TE-13细胞，建立稳定干扰GLUT-1表达的TE-13细胞株，分成GLUT-1-shRNA组和阴性对照组进行对比研究。采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测GLUT-1-shRNA对TE-13细胞GLUT-1 mRNA及其蛋白表达的影响。CCK-8法、FCM法和Transwell小室迁移实验分别检测沉默GLUT-1表达后对TE-13细胞增殖、细胞周期和迁移的影响；同时采用蛋白质印迹法检测细胞迁移以及乏氧相关蛋白的表达情况。结果采用慢病毒将GLUT-1-shRNA转入TE-13细胞后，可明显下调GLUT-1蛋白（t=6.713，P<0.01）和mRNA的表达水平（t=4.181，P<0.05）。与阴性对照组相比，GLUT-1干扰后细胞的增殖至72 h（t=3.097，P<0.05）和96 h（t=3.497，P<0.05）明显被抑制，同时细胞的迁移能力可见下降，但是细胞周期至24 h未见影响；基质金属蛋白酶的MMP-9（t=6.895，P<0.01）和缺氧诱导因子HIF-1α（t=13.74，P<0.001）的表达明显下调，但是MMP-2的表达没有变化（t=2.582，P>0.05）。结论沉默GLUT-1的表达可抑制食管磷癌细胞株TE-13细胞的增殖和迁移，并明显下调细胞内MMP-9和HIF-1α蛋白的表达，为寻找靶向治疗食管癌新靶点提供了初步的实验基础。