| RNA干扰靶向抑制酪氨酸蛋白激酶对哮喘小鼠树突状细胞功能的影响 |
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| 引用本文： | 郑永华,陆晶晶,郭忠良,任涛,梁永杰.RNA干扰靶向抑制酪氨酸蛋白激酶对哮喘小鼠树突状细胞功能的影响[J].中国呼吸与危重监护杂志,2009,8(5):487-491. |
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| 作者姓名： | 郑永华 陆晶晶 郭忠良 任涛 梁永杰 |
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| 作者单位： | 1. 东阳市人民医院呼吸内科,浙江东阳,322100
2. 同济大学附属东方医院呼吸内科,上海,200120 |
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| 摘 要： | 目的 通过特异性微小干扰RNA(siRNA)靶向抑制小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)的酪氨酸蛋白激酶(Syk)的基因表达,阻断树突状细胞的成熟,从而阻断Syk所介导的细胞内及细胞间的信号传导通路,研究Syk与DC之间的关系.方法 化学法合成21-23 bp的小鼠树突状细胞Syk基因siRNA片段A、B、C、D,用Lipofectamine 2000作为转染试剂,将siRNA片段转染哮喘小鼠骨髓来源DC,作用48 h后再与正常小鼠脾脏来源T淋巴细胞混合反应48 h,之后用ELISA法检测T淋巴细胞分泌细胞因子(IL-4、lL-13、IL-2和INF-γ)的水平.用Western Blot检测DC表达Syk蛋白的量,判断Syk基因是否被沉默,剔除无效片段.结果 siRNA片段A、C、D干扰组小鼠DC细胞Syk蛋白表达减少;B组没有明显变化,为无效片段.siRNA干扰组IL-4、IL-13的水平较未干扰组明显下降(P均<0.05),IL-2和INF-γ水平无显著差异(P>0.05).结论 Syk特异性SiRNA能够有效抑制Syk基因表达,可阻遏DC的抗原递呈作用以及活化、分化T淋巴细胞的功能.
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| 关 键 词： | 哮喘 小干扰RNA 树突状细胞 酪氨酸蛋白激酶 细胞因子 |
Small Interfering RNAs Specific for Spleen Tyrosine Kinase Inhibit Maturation of Dendritic Cells of Asthmatic Mice in Vitro |
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| ZHENG Yong-hua,LU Jing-jing,GUO Zhong-liang,REN Tao,LIANG Yong-jie.Small Interfering RNAs Specific for Spleen Tyrosine Kinase Inhibit Maturation of Dendritic Cells of Asthmatic Mice in Vitro[J].Chinese Journal of Respiratory and Critical Care Medicine,2009,8(5):487-491. |
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| Authors: | ZHENG Yong-hua LU Jing-jing GUO Zhong-liang REN Tao LIANG Yong-jie |
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