| 胃泌素对结肠癌细胞中粘着斑激酶通路下游E-钙粘蛋白/β-连环蛋白复合物的影响 |
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| 引用本文： | 曹俊,于皆平,周岚,宋文冲,罗和生,于红刚.胃泌素对结肠癌细胞中粘着斑激酶通路下游E-钙粘蛋白/β-连环蛋白复合物的影响[J].中华消化杂志,2006,26(12):813-817. |
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| 作者姓名： | 曹俊 于皆平 周岚 宋文冲 罗和生 于红刚 |
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| 作者单位： | 1. 430060,武汉大学人民医院消化内科
2. 湖北中医学院中医药试验中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助(30470782) |
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| 摘 要： | 目的探讨胃泌素对结肠癌细胞CoLo320WT中粘着斑激酶（FAK）通路下游E-钙粘蛋白／β-连环蛋白（E-cadherin／β-catenin）复合物分布的影响；方法脂质体转染表达胃泌索受体CCK-2R的pCR3．1／OR质粒于结肠癌细胞CoLo320中。G418筛选出稳定表达CCK-2R的阳性克隆，RT-PCR鉴定，转染成功命为CoLo320WT。应用10^-8mmol／L 胃泌素（G17）以时间梯度（0h、1h、6h、12h、24h、48h）干预CoLo320WT细胞，同时应用10^-6mmol／L胃泌素受体拮抗剂L365，260干预CoLo320WT细胞30min，再予10^-8mmol／L胃泌素干预。采用免疫印迹法检测磷酸化的FAK Tyr397和总FAK的表达。采用免疫共沉淀和免疫印迹法检测CoLo320WT中TX-100溶解和未溶部分中的E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的表达。用免疫细胞化学法观察E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的在胞膜、胞质和胞核的分布。结果随着胃泌素干预时间的延长，细胞中磷酸化的FAK Tyr397的表达量呈增加趋势，12h达最大值。胃泌素受体拮抗剂L365，260阻断后磷酸化的FAK Tyr397表达减少。而胃泌素对总FAK没有明显影响。TX-100可溶性部分中E-钙粘蛋白和酽连环蛋白的量在胃泌素干预后表达减少，拮抗剂L365，260阻断后又增加。而TX-100不溶解部分中表达却相反。免疫细胞化学观察到在胃泌素干预下CoLo320WT细胞中E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的分布发生胞质和胞核转移。结论胃泌素与其受体CCK-2受体结合，磷酸化的FAK Tyr397、激活FAK通路进而影响结肠癌细胞中E-钙粘蛋白和β-连环蛋白的分布，促进结肠癌细胞侵袭和转移。
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| 关 键 词： | 胃泌素 大肠癌 E-钙粘蛋白／β-连环蛋白复合物 |
| 修稿时间： | 2006年4月4日 |
Effect of gastrin on E-cadherin/β-catenin complex in focal adhesion kinase pathway of CoLo320WT cell lines |
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| CAO Jun YU Jie-ping ZHOU Lan.Effect of gastrin on E-cadherin/β-catenin complex in focal adhesion kinase pathway of CoLo320WT cell lines[J].Chinese Journal of Digestion,2006,26(12):813-817. |
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| Authors: | CAO Jun YU Jie-ping ZHOU Lan |
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| Institution: | CAO Jun YU Jie-ping ZHOU Lan.Department of Gastroenterology,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060,China |
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