RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响

目的：应用RNA干扰（RNAi）技术抑制胃癌BGC-823细胞中survivin和HIF-1α基因的表达，探讨其对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响。方法：分别设计并合成经过化学修饰的靶向survivin和HIF1α mRNA的小干扰RNA （siRNAs），同时合成错义RNA （SCR），采用HifectinⅡ真核体外转染胃癌BGC-823细胞，将转染siRNA-survivin、siRNA-HIF-1α和SCR的各组细胞分别命名为sis组、siH组和SCR组，同时设空白对照组（无血清培养基），RT-PCR法检测各组细胞中survivin和HIF-1αmRNA表达水平。将胃癌BGC-823细胞分为单干扰组（survivin-siRNA，sis组）、联合干扰组（survivin-siRNA+HIF1α-siRNA，sis+siH组）、非靶向特异性组（SCR组）和空白对照组（无血清培养基），MTT法检测各组细胞增殖活性，Western blotting法检测各组细胞中survivin和HIF-1α蛋白表达水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果：与空白对照组比较，sis组细胞中survivin mRNA表达水平和siH组细胞中HIF-1αmRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较，SCR组细胞增殖活性无明显变化（P>0.05），sis组和sis+siH组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）；与sis组比较，sis+siH组细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。与空白对照组比较，sis+siH组细胞中surviving和HIF-1α蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞凋亡率明显升高（P<0.01）。结论：联合靶向沉默survivin和HIF-1α基因可下调靶基因的表达，抑制胃癌BGC-823细胞增殖，促进细胞凋亡，RNAi基因沉默技术有望成为治疗胃癌的新方法。