| 复制缺陷的重组腺病毒介导的血管形成素-1基因的制备及其体外表达的研究 |
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| 引用本文： | 陈仕林,梅举,程茅薇,徐志云,张宝仁,黄盛东,景华,张石江. 复制缺陷的重组腺病毒介导的血管形成素-1基因的制备及其体外表达的研究[J]. 医学研究生学报, 2001, 14(6): 471-473,477 |
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| 作者姓名： | 陈仕林 梅举 程茅薇 徐志云 张宝仁 黄盛东 景华 张石江 |
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| 作者单位： | 1. 南京军区南京总医院胸心外科,
2. 第二军医大学长海医院胸心外科, |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助课题 (批准号 :39970 735 ) |
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| 摘 要： | 目的：探讨重组腺病毒载体构建及其在体外的有效转录。方法：以RT-PCR自人脾组织中克隆和筛选出血管形成素-1（Ang-1）全长cDNA，测序鉴定正确后，经salI酶切并克隆到E1、E3缺失的Ad5腺病毒载体（PAxCAwt）中，应用cosmid-TPC磷酸钙共沉淀法，将含有左向转录表达单元重组载体PAxCAwt Ang-1与DNA-末端肽复合物（TPC）-同转染293细胞中，经挑选克隆、病毒扩增、纯化、浓度滴度测定，制备了纯化病毒颗粒，以此转染人脐静脉上皮细胞（ECV304），收集转染后1-7天的细胞，用RT-PCR检测转染细胞中外源性Ang-1基因转录。结果：实验所克隆的Ang-1 DNA片段为含有信号肽结构的长度为1515bp的全长cDNA，与文献报道一致。外源基因在转染细胞中能有效转录。结论：Ad5-PAxCAwt转导的血管形成素-1基因可在体外有效表达转录。
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| 关 键 词： | 血管形成素-1 腺病毒 基因转染 制备 体外表达 |
| 文章编号： | 1008-8199(2001)06-0471-03 |
A study on the expression of Ang-1 gene mediated by recombinant adenovirus in ECV304 cell |
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| CHEN Shi lin ,MEI Ju ,CHENG Mao wei,XU Zhi yun ,ZHANG Bao ren ,HUANG Sheng dong ,JING Hua ,ZHANG Shi jiang. A study on the expression of Ang-1 gene mediated by recombinant adenovirus in ECV304 cell[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2001, 14(6): 471-473,477 |
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| Authors: | CHEN Shi lin MEI Ju CHENG Mao wei XU Zhi yun ZHANG Bao ren HUANG Sheng dong JING Hua ZHANG Shi jiang |
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| Affiliation: | CHEN Shi lin 1,MEI Ju 2,CHENG Mao wei,XU Zhi yun 2,ZHANG Bao ren 2,HUANG Sheng dong 2,JING Hua 1,ZHANG Shi jiang 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ang 1 Adenovirus Gene transfection |
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